| 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A上调硫氧还蛋白还原酶1基因表达的研究 |
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| 引用本文： | 纪冬,成军,郭江,杨瑗,董菁,王建军,刘妍.丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A上调硫氧还蛋白还原酶1基因表达的研究[J].胃肠病学和肝病学杂志,2005,14(4):341-345. |
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| 作者姓名： | 纪冬 成军 郭江 杨瑗 董菁 王建军 刘妍 |
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| 作者单位： | 解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,北京,100039 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，军队科技攻关项目，军队杰出人才基金，军队科技攻关项目，军队科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A对硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)启动子转录的激活作用.方法以我室构建的丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式调节基因的cDNA文库抑制性消减杂交(SSH)筛选结果及基因表达谱芯片结果为基础,利用生物信息学技术确定TXNRD1的启动子区域(TXNRD1p),聚合酶链反应(PCR)扩增TXNRD1p,克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-TXNRD1p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与pcDNA3.1(-)-NS5A共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果pCAT3-TXNRD1p和pcDNA3.1(-)-NS5A瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的9.6倍,pCAT3-TXNRD1p的2.1倍.本实验进一步验证了我室利用SSH技术及基因表达谱技术发现的HCV NS5A蛋白反式激活TXNRD1基因转录作用的结果.结论我室克隆的TXNRD1启动子有顺式激活下游基因的活性;HCV的NS5A蛋白具有对TXNRD1基因启动子的反式激活作用.
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 启动子 反式激活 |
| 文章编号： | 1006-5709（2005）04-0341-05 |
| 收稿时间： | 2004-09-14 |
| 修稿时间： | 2004年9月14日 |
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