| 含IL-24基因重组慢病毒表达载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制作用 |
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| 引用本文： | 周峰,张海清,史震,孙伟,汤仁仙,郑葵阳.含IL-24基因重组慢病毒表达载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制作用[J].江苏医药,2010,36(19). |
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| 作者姓名： | 周峰 张海清 史震 孙伟 汤仁仙 郑葵阳 |
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| 作者单位： | 1. 221004,徐州医学院病原生物学与免疫学教研室肿;瘤生物治疗重点实验室
2. 徐州医学院病原生物学与免疫学教研室,221004 |
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| 基金项目： | 江苏省高校自然科学研究指导性课题,徐州医学院院课题,徐州医学院肿瘤生物治疗重点实验室开放课题 |
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| 摘 要： | 目的 探讨白细胞介素(IL)24基因表达目的蛋白IL-24的方法,检测IL-24对肝癌细胞生长的影响.方法 自经5μg/ml植物血凝素(PHA)刺激的正常人单个核细胞(PBMCs)中提取总RNA,RT-PCR扩增出IL-24 cDNA,插入到pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen中构建成慢病毒转移载体pHAGE-IL-24,转染HEK 293T细胞.荧光显微镜观察293T细胞中绿色荧光蛋白(GFP)表达;梯度稀释法测定病毒滴度,感染HEK 293T细胞48 h后进行RT-PCR和Western blot检测IL-24的基因和蛋白表达;MTT法检测细胞的增殖.结果 限制性内切酶检测和基因测序证实成功构建了携带IL-24基因的慢病毒表达载体,滴度为5×106TU/ml.以MOI为5.0的重组慢病毒感染靶细胞HepG2 48 h后,能够检测到外源基因IL-24的蛋白表达.IL-24能够抑制肝癌细胞的生长.结论 成功构建了含IL-24基因的慢病毒表达载体,获得的病毒能够有效感染HepG2细胞,并在其中大量表达目的蛋白;IL-24能够抑制肝癌细胞的生长.
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 白细胞介素24 肝癌 |
Construction of recombinant expression Ientivirus vector carrying IL-24 gene and its inhibitory effect on HepG2 growth |
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