| CD2AP启动子的克隆和活性分析 |
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| 引用本文： | 顾曼丽,卢春.CD2AP启动子的克隆和活性分析[J].江苏医药,2010,36(17). |
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| 作者姓名： | 顾曼丽 卢春 |
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| 作者单位： | 1. 南京医科大学第一附属医院河西分院妇保科,210036
2. 南京医科大学微生物学和免疫学系 |
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| 摘 要： | 目的 构建表达CD2AP基因转录起始位点上游启动子的表达质粒,转染人类胚胎肾(HEK)-293T细胞,评价其启动子活性.方法 以人全血细胞总DNA为模板,PCR扩增CD2AP转录起始位点上游2082 bp的启动子区片段.亚克隆此片段至无启动子活性的pGL-3基本载体荧光素酶报告基因上游的多克降位点,构建含CD2AP启动子的重组报告质粒.转染HEK-293T细胞,行荧光素酶活性检测,计算相对活性单位(RLU).生物信息学分析转录因子结合位点.结果 酶切,测序鉴定证实成功构建含有CD2AP基因转录起始位点上游2082 bp的启动区的表达质粒.CD2AP的启动子与正常的pGL-3基本质粒比较,其RLU增加了74.8倍.其上游启动子区序列中含多个转录因子结合序列如AP1、Sp1、CREB和GATA-1等.结论 CD2AP转录起始位点上游序列在HEK-293T细胞中具有较强的启动活性.
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| 关 键 词： | CD2相关蛋白 启动子 |
Construction of promoter CD2AP and analysis of its promoter activity in human embryonic kidney-293T cells |
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| GU Manli,Lu Chun.Construction of promoter CD2AP and analysis of its promoter activity in human embryonic kidney-293T cells[J].Jiangsu Medical Journal,2010,36(17). |
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| Authors: | GU Manli Lu Chun |
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