加味葛根芩连汤对2型糖尿病db/db小鼠胰腺组织TGR5/cAMP/GLP-1信号通路的影响

目的 探讨加味葛根芩连汤对肥胖型2型糖尿病（T2DM）模型小鼠血糖血脂及胰腺组织中G蛋白偶联胆汁酸受体5（TGR5）相关途径的影响。方法 将10只7周龄无特定病原体（SPF）级雄性m/m小鼠及50只7周龄SPF级雄性db/db小鼠在SPF级实验室适应性喂养1周。m/m小鼠作为空白组。成模后随机分为5组，每组10只，分别作为模型组、二甲双胍组（0.2 g·kg^-1）、加味葛根芩连汤高、中、低剂量组（31.9、19.1、6.4 g·kg^-1），灌胃体积均为10 mL·kg^-1，模型组和空白组灌服等体积蒸馏水，1次/d，连续12周。定期检测小鼠空腹血糖（FBG）。药物干预12周后，检测血清中糖化血清蛋白（GSP）、血清葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平；采用苏木素-伊红（HE）染色观察各组小鼠胰腺组织病理改变，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胰腺组织TGR5、蛋白激酶A（PKA）、磷酸化（p）-PKA、环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）、p-CREB、前蛋白转化酶1/3（PC1/3）、胰高糖素样肽-1（GLP-1）蛋白的表达水平，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胰腺组织环磷腺苷（cAMP）的含量。结果 与空白组比较，模型组小鼠胰腺组织出现病理学改变；小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平显著增高（P<0.01），HDL-C水平明显降低（P<0.05）；胰腺组织中TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平显著降低（P<0.01）；胰腺组织中cAMP的含量显著降低（P<0.01）。与模型组比较，治疗组胰腺组织病变程度减轻；加味葛根芩连汤高剂量组及二甲双胍组均能够明显降低db/db小鼠FBG、GSP、GLU、TC、TG、LDL-C水平（P<0.05，P<0.01），显著增高db/db小鼠HDL-C水平（P<0.01）；除加味葛根芩连汤中剂量组GLP-1蛋白外，加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组TGR5、p-PKA（Thr197）/PKA、p-CREB（Ser133）/CREB、PC1/3、GLP-1蛋白表达水平均有不同程度的增加（P<0.05，P<0.01）；加味葛根芩连汤高、中剂量组及二甲双胍组胰腺组织中cAMP的含量明显增高（P<0.05，P<0.01）。结论 加味葛根芩连汤能够改善T2DM模型db/db小鼠的葡萄糖稳态，其机制可能与调控TGR5/cAMP/GLP-1信号通路相关蛋白表达有关。

Effect of Modified Gegen Qinliantang on TGR5/cAMP/GLP-1 Signaling Pathway in Pancreatic Tissue of Type 2 Diabetes Mellitus db/db Mice