菟丝子对恐伤孕鼠子代学习记忆及海马m6A修饰的影响

目的 观察菟丝子对恐伤孕鼠所产子代学习记忆能力及海马N6-甲基腺苷（m⁶A）相关修饰酶和m⁶A总水平的影响。方法 将45只孕鼠随机分为空白组、模型组和菟丝子组。在孕1 d~孕19 d，模型组和菟丝子组采用旁观电击法造模，菟丝子组5 g·kg^-1·d^-1菟丝子水煎剂灌胃，其余2组等量纯净水灌胃处理，所产仔鼠延续母代分组。仔鼠于21 d龄进行水迷宫实验观察行为学改变；采用透射电镜观察仔鼠海马神经元发育情况；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）、免疫组化法（IHC）分别检测仔鼠海马甲基转移酶样蛋白3（METTL3）、甲基转移酶样蛋白14（METTL14）、Wilms瘤1相关蛋白（WTAP）、脂肪量和肥胖相关蛋白（FTO）、Alk B同源蛋白5（ALKBH5） mRNA及蛋白表达水平；采用高效液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）检测仔鼠海马m⁶A总含量。结果 与空白组比较，模型组仔鼠平均潜伏期延长，进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著减少（P<0.01）；海马CA1、CA3神经元结构损伤严重，线粒体肿胀，内质网扩张，部分突触结构模糊，数量较少；METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5表达水平下降，m⁶A总水平明显下降（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，菟丝子组仔鼠平均潜伏期缩短，进入目标象限次数、目标象限停留时间及穿越平台次数均显著增加（P<0.01）；海马CA1、CA3神经元损伤程度减轻，线粒体、内质网结构较好，突触结构清晰、完整，分布密集；METTL3、METTL14、FTO表达水平上升，m⁶A总水平明显上升（P<0.05，P<0.01）。结论 菟丝子能够有效改善孕期恐伤肾所致的子代学习记忆能力下降，保护海马神经元，上调海马METTL3、METTL14、FTO表达水平及m⁶A总水平。

Effect of Cuscutae Semen on Learning and Memory and N6-methyladenosine Modification in Hippocampus of Offspring of Fear-damaged Pregnant Rats