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当归香豆酸-3-羟化酶基因ASC3H的克隆及表达模式与阿魏酸含量相关性分析
引用本文:王漫青,程湘,王广,明玥,曾静怡,白小娜,张绍鹏,徐燃. 当归香豆酸-3-羟化酶基因ASC3H的克隆及表达模式与阿魏酸含量相关性分析[J]. 中国实验方剂学杂志, 2023, 29(4): 161-166
作者姓名:王漫青  程湘  王广  明玥  曾静怡  白小娜  张绍鹏  徐燃
作者单位:武汉轻工大学 生命科学与技术学院,武汉 430023
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目(81903782);湖北省农业科技创新中心重大科技研发项目
摘    要:目的:对当归中香豆酸-3-羟化酶基因(C3H)全长进行克隆,进行生物信息学与基因表达模式分析,结合当归根不同组织部位阿魏酸的含量,推测ASC3H基因功能。方法:基于前期转录组测序结果,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)克隆全长cDNA序列,运用生物信息学方法分析该序列特征,并利用Real-time PCR和高效液相色谱法(HPLC)分别测定当归不同组织中ASC3H基因表达量及阿魏酸含量。结果:克隆获得当归ASC3H全长基因(登录号MN2550298),开放阅读框(ORF)长度为1 530 bp,编码509个氨基酸,理论相对分子质量为57.86 kDa,等电点8.36,为不含信号肽的亲水性不稳定蛋白,定位于叶绿体中,有跨膜区,具有多个磷酸化位点,含有细胞色素P450的保守结构域CGYDWPKGYGPIINVW_P450(383~399 aa);多重氨基酸序列比对分析结果显示ASC3H与其他植物的C3H基因具有较高相似性,并与同科植物大阿米芹的同源性最高;Real-time PCR结果显示ASC3H基因在当归不同组织的表达量不同;HPLC结果表明阿魏酸成分在当归根...

关 键 词:当归  阿魏酸  香豆酸-3-羟化酶  基因克隆  生物信息学分析  表达分析  含量测定
收稿时间:2022-02-13

Cloning and Expression Patterns of Coumarate-3-hydroxylase Gene from Angelica sinensis and Its Correlation with Content of Ferulic Acid
WANG Manqing,CHENG Xiang,WANG Guang,MING Yue,ZENG Jingyi,BAI Xiaon,ZHANG Shaopeng,XU Ran. Cloning and Expression Patterns of Coumarate-3-hydroxylase Gene from Angelica sinensis and Its Correlation with Content of Ferulic Acid[J]. China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2023, 29(4): 161-166
Authors:WANG Manqing  CHENG Xiang  WANG Guang  MING Yue  ZENG Jingyi  BAI Xiaon  ZHANG Shaopeng  XU Ran
Abstract:
Keywords:
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