天南星、半夏的PCR-RFLP鉴别

目的：近年来，随着半夏和天南星的野生资源急剧下降、药材栽培技术不成熟等问题出现，市场的混伪品频繁出现，而其主要鉴别特征在药材流通中大多消失。因此，迫切需要建立一种可以快速、有效鉴别天南星和半夏特异性的分子鉴定方法。方法：通过比对天南星、半夏及其混伪品的rbc L序列，分别选择了天南星和半夏的特异性酶切位点HaeⅢ和DraⅠ，采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）进行鉴定，建立并优化了PCR-RFLP反应主要体系条件，并对其耐用性和正品、掺杂品及混伪品的检出能力进行了考察。结果：建立了天南星和半夏药材的PCR-RFLP鉴别方法，在退火温度为54℃、循环次数为35个，DNA模板量为3～30 ng时，天南星和半夏经过特异性引物扩增后，分别能被HaeⅢ和DraⅠ限制性内切酶酶切，产生两片段或切开的小片段，并在100～250 bp出现单一条带，而混伪品无法酶切，且均在250 bp出现条带，该方法对天南星或半夏的掺杂品和混伪品具有高度准确的鉴别能力。结论：该研究建立的PCR-RFLP方法可以快速鉴别天南星、半夏。

Identification of Arisaematis Rhizoma and Pinelliae Rhizoma by PCR-RFLP