丹参素对糖尿病肾病大鼠 Notch1/免疫球蛋白 κJ区重组信号结合蛋白 /Msh同源异型基因 2信号通路及钙磷代谢的影响

目的探讨丹参素通过调控 Notch1/免疫球蛋白 κJ区重组信号结合蛋白( RBP-Jκ)/Msh同源异型基因 2(Msx2)信号通路对糖尿病肾病大鼠钙磷代谢的影响。方法 2019年 10月至 2020年 4月，北京维通利华实验动物科技有限公司购入 SD大鼠，采用高糖高脂饲养 4周、腹腔注射链脲佐菌素( STZ，40 mg/kg)建立糖尿病肾病大鼠模型。建模后按随机数字表法分为模型组、丹参素(低、中、高)剂量组(2.5 mL·kg-1 ·d-1、5.0 mL·kg-1 ·d-1、10.0 mL·kg-1 ·d-1)、糖适平组(阳性对照， 9.45 mL·kg-1 ·d-1)，每组 10只；对照组 10只大鼠基础饲料饲养。给予相应的药物连续灌胃 4周， 1次/天。实验结束，观察大鼠一般情况；血糖仪检测空腹血糖( FBG)水平； 24 h尿微量白蛋白( 24 h尿 mALB)试剂盒检测 24 h尿 mALB水平；全自动生化分析仪检测血清中钙、磷水平；苏木精 -伊红( HE)染色检测大鼠肾脏组织形态； Von Kossa染色检测大鼠肾主动脉钙盐沉积情况；蛋白免疫印迹检测大鼠肾脏组织中 Notch1、RBP-Jκ、Msx2、Jagged1、Notch1基因的胞内域( N1-ICD)蛋白水平。结果给药前，与对照组相比，造模组大鼠的 FBG、24 h尿 mALB水平升高( P<0.05)。给药后，模型组大鼠精神萎靡、活动减少，反应迟钝、眼神无力，多饮多食、排尿量增加、垫料易潮湿；出现肾小球肥大、基膜增厚现象，组织纤维化、炎症浸润明显；肾主动脉血管内膜、中膜弹性纤维间出现大量黑色颗粒，血管钙化严重。丹参素(低、中、高)给药组随着剂量的增加，大鼠活动逐渐恢复正常，反应迟钝减少，但仍有多饮多食、排尿量增加、垫料易潮湿现象；肾小球肥大、基膜增厚缓解，组织纤维化消失、炎症缓解；肾主动脉血管内膜、中膜弹性纤维间黑色颗粒减少，血管钙化稍缓解。与对照组相比，模型组 FBG、24 h尿 mALB水平，血清中钙［( 2.89±0.14)mmol/L比( 2.24±0.09) mmol/L］、磷［( 3.48±0.28)mmol/L比( 2.49±0.21)mmol/L］、钙×磷［( 126.29±13.16)mg2/dL2比( 71.06±13.48)mg2/dL2］，肾脏组织中 Notch1［( 1.06±0.15)比( 0.31±0.06)］、 RBP-Jκ［( 1.15±0.03)比( 0.37±0.04)］、 Msx2［( 0.69±0.05)比( 0.23±0.04)］、 Jagged1、N1-ICD蛋白水平升高( P<0.05)；与模型组相比，丹参素低剂量组 24 h尿 mALB水平，血清中钙、磷、钙×磷，肾脏组织中 Notch1，RBP-Jκ、 N1-ICD蛋白水平降低，丹参素(中、高)剂量组、糖适平组 FBG、24 h尿 mALB水平，血清中钙、磷、钙×磷，肾脏组织中 Notch1、 RBP-Jκ、Msx2、Jagged1、N1-ICD蛋白水平降低( P<0.05)。结论丹参素可通过调控 Notch1/RBP-Jκ/Msx2信号通路发挥对糖尿病肾病大鼠钙磷沉积现象的改善。