用重叠延伸聚合酶链反应制备鸭乙型肝炎病毒基因点突变 |
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作者姓名: | 徐建业 |
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作者单位: | 重庆市肿瘤研究所中心研究室,英国皇家福利医院 |
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摘 要: | 目的制备含鸭乙型肝炎病毒(DHBV)前核心区终止密码突变的基因片段,以对此基因突变作有关生物学研究。方法用重叠延伸聚合酶链反应(OE-PCR)制备含此人工定向点突变的基因片段;用不对称聚合酶链反应(asy-PCR)制备单链DNA模板作测序。结果凝胶电泳显示OE-PCR产物与克隆DHBVDNA酶切片段位置一致,测序证实该点突变存在。结论用OE-PCR作人工定向基因突变,不需要克隆制备单链模板及筛选阳性克隆,2天内即可出结果,较传统方法简便、快速、有效。
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关 键 词: | 乙型肝炎病毒.鸭 聚合酶链反应 基因突变 |
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