| 人高尔基体蛋白GP73基因的克隆?表达?单克隆抗体的制备及鉴定 |
| |
| 引用本文： | 徐 言,曾晓燕,张 晓,金 秋,张建平,焦永军.人高尔基体蛋白GP73基因的克隆?表达?单克隆抗体的制备及鉴定[J].南京医科大学学报,2012(3):301-305. |
| |
| 作者姓名： | 徐 言 曾晓燕 张 晓 金 秋 张建平 焦永军 |
| |
| 作者单位： | 南京医科大学第二附属医院普通外科,江苏 南京 210011;卫生部肠道病原微生物重点实验室,江苏省疾病预防控制中心病原微生物研究所,江苏 南京 210009;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏 南京 210029;南京医科大学第二附属医院普通外科,江苏 南京 210011;卫生部肠道病原微生物重点实验室,江苏省疾病预防控制中心病原微生物研究所,江苏 南京 210009 |
| |
| 基金项目： | 江苏省卫生厅科研项目(H200814);江苏省卫生厅医学重点人才课题(RC2011082) |
| |
| 摘 要： | 目的:高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)是新近发现的肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的重要血清学标志物?通过克隆?表达人GP73,制备抗GP73单克隆抗体并鉴定其特性?方法:克隆GP73基因,构建GP73原核表达载体pComb3XSS-GP73,诱导表达,以HisFF Trap亲和层析柱纯化GP73-6×His重组融合蛋白?以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗GP73单克隆抗体?以间接法ELISA检测抗体效价;Western blot鉴定抗体特异性;免疫共沉淀法初步检测肝癌患者血清中GP73表达水平?结果:成功表达并纯化了GP73-6×His重组蛋白;获得5株稳定分泌抗人GP73单克隆抗体杂交瘤细胞株;免疫共沉淀证实抗GP73 单克隆抗体能与肝癌患者血清中GP73蛋白特异性结合,GP73水平在肝癌患者血清中较正常人显著升高?结论:成功制备了抗人GP73单克隆抗体,为后期建立检测人GP73的双抗体夹心ELISA方法打下基础?
|
| 关 键 词： | GP73 单克隆抗体 肝细胞性肝癌 肿瘤标志物 |
| 收稿时间： | 2011/10/29 0:00:00 |
Cloning,expression and development of monoclonal antibody of human Golgi protein |
| |
| XU Yan,ZENG Xiao-yan,ZHANG Xiao,JIN Qiu,ZHANG Jian-ping and JIAO Yong-jun.Cloning,expression and development of monoclonal antibody of human Golgi protein[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2012(3):301-305. |
| |
| Authors: | XU Yan ZENG Xiao-yan ZHANG Xiao JIN Qiu ZHANG Jian-ping and JIAO Yong-jun |
| |
| Institution: | Department of General Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011;Key Laboratory of Enteric Pathogenic Microbiology,Ministry of Health,Institute of Pathogenic Microbiology,Jiangsu Provincial Center for Disease Prevention and Control,Nanjing 210009;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029,China;Key Laboratory of Antibody Technique of Ministry of Health,NJMU,Nanjing 210029,China;Department of General Surgery,the Second Affiliated Hospital of NJMU,Nanjing 210011;Key Laboratory of Enteric Pathogenic Microbiology,Ministry of Health,Institute of Pathogenic Microbiology,Jiangsu Provincial Center for Disease Prevention and Control,Nanjing 210009 |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | GP73 monoclonal antibody HCC tumor markers |
|
| 点击此处可从《南京医科大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《南京医科大学学报》下载免费的PDF全文 |
|
