| 小鼠11β-HSD1基因过表达的前成骨细胞系的建立 |
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| 作者姓名： | 祁寒梅 吴 琳 王 龙 毕建华 丁国宪 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏 南京 210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏 南京 210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年基金项目(30900505) |
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| 摘 要： | 目的:探索小鼠11β-HSD1基因过表达的前成骨细胞系的建立方法?方法:构建过表达小鼠11β-HSD1基因的慢病毒载体,包装?收集?纯化慢病毒,感染小鼠MC3T3-E1前成骨细胞系,用BSD(一种核苷抗生素)筛选出感染成功的细胞,荧光定量PCR及Western blot检测11β-HSD1过表达情况,诱导成骨分化后用茜素红染色法染色矿化结节?结果:成功构建了小鼠11β-HSD1基因过表达慢病毒载体,高效感染MC3T3-E1细胞系?荧光定量PCR及Western blot结果显示,11β-HSD1过表达病毒组细胞11β-HSD1 mRNA水平是空载病毒对照组的17.4倍,蛋白表达量比空载病毒对照组增加?茜素红染色结果表明慢病毒感染的细胞成骨分化良好,细胞正常成骨分化功能未受影响,11β-HSD1过表达细胞成骨分化减少?结论:本研究成功建立了过表达小鼠11β-HSD1的前成骨细胞系,为研究11β-HSD1对成骨细胞的具体作用提供了研究基础?
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 11β-HSD1 MC3T3-E1前成骨细胞系 |
| 收稿时间： | 2011-12-02 |
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