摘 要: | 为使rBPIm23重组抗菌蛋白在毕赤酵母表达系统中分泌表达,拟构建synBPIm600酵母表达载体。以pUC18synBPI414质粒为模板扩增synBPI200基因片段,经XhoI/EcoRI双酶切获得synBPI185bp基因片段;EcoRI/SalI双酶切PBV220BPIm600质粒获得BPIm420基因片段;将上述2个基因片段连接后定向克隆到pPICZα酵母表达载体上。连接产物转化E.coliTOP10F′,在含Zeocin的低盐LB固体培养基上筛选阳性转化子。阳性克隆菌经菌落PCR法鉴定、酶切分析和测序鉴定,结果与预期相符。提示:成功构建了pPICZαsynBPIm600酵母表达载体.
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