pPICZα-synBPIm600酵母表达载体的构建和鉴定 |
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引用本文: | 丛敏,靖学芳,刘振龙,孙明洁,安云庆.pPICZα-synBPIm600酵母表达载体的构建和鉴定[J].首都医学院学报,2004,25(1):35-39. |
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作者姓名: | 丛敏 靖学芳 刘振龙 孙明洁 安云庆 |
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作者单位: | [1]首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心/首都医科大学2000级硕士 [2]首都医科大学免疫学教研室/吉林大学免疫学系2001级博士 [3]首都医科大学免疫学教研室 |
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基金项目: | 北京市教委科技发展重点项目(KZ200410025010)资助课题 |
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摘 要: | 为使rBPIm23重组抗菌蛋白在毕赤酵母表达系统中分泌表达,拟构建synBPIm600酵母表达载体。以pUC18synBPI414质粒为模板扩增synBPI200基因片段,经XhoI/EcoRI双酶切获得synBPI185bp基因片段;EcoRI/SalI双酶切PBV220BPIm600质粒获得BPIm420基因片段;将上述2个基因片段连接后定向克隆到pPICZα酵母表达载体上。连接产物转化E.coliTOP10F′,在含Zeocin的低盐LB固体培养基上筛选阳性转化子。阳性克隆菌经菌落PCR法鉴定、酶切分析和测序鉴定,结果与预期相符。提示:成功构建了pPICZαsynBPIm600酵母表达载体.
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关 键 词: | 杀菌/渗透增强蛋白 rBPIm23重组抗菌蛋白 表达载体 巴斯德毕赤酵母 |
收稿时间: | 2003-10-14 |
修稿时间: | 2003年10月14 |
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