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| 外源Smad7转染肝星状细胞及对转化生长因子β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响 | |
| 引用本文： | 杨小艳,杨勇,郑勇,李睿,周婷.外源Smad7转染肝星状细胞及对转化生长因子β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响[J].中国组织工程研究与临床康复,2009,13(50). |
| 作者姓名： | 杨小艳 杨勇 郑勇 李睿 周婷 |
| 作者单位： | 1. 石河子大学医学院第一附属医院,老干一科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008 2. 石河子大学医学院第一附属医院,心内二科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008 3. 石河子大学医学院第一附属医院,消化内科,新疆维吾尔自治区石河子市,832008 4. 石河子大学医学院第一附属医院,中心实验室,新疆维吾尔自治区石河子市,832008 |
| 基金项目： | 教育部科学技术研究重点项目，兵团博士基金资助课题 |
| 摘 要： | 背景:Smad7是转化生长因子β信号转导途径的主要抑制性蛋白,具有抗纤维化的作用.目的:构建并鉴定大鼠Srnad7真核表达质粒,观察外源Smad7可否有效转染肝星状细胞T6,并进一步研究其对转化生长因子β及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平的影响.设计、地点:基因重组及细胞观察实验,于新疆石河子大学医学院第一附属医院完成.材料:pcDNA3.1(+)质粒为课题组保留;大肠杆菌DH5a系石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室所赠;肝星状细胞T6细胞由中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所提供品.方法:采用基因重组技术将Smad7cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建大鼠Smad7真核表达质粒.脂质体介导转染肝星状细胞T6细胞,分为正常对照、空质粒及转染组,G418筛选,挑取阳性细胞.主要观察指标:反转录-聚合酶链反应法检测各组中Smad7、转化生长因子β及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达水平.结果:酶切和测序结果证实Smad7真核表达质粒构建成功.Smad7转染组与正常对照组、空质粒组比较:Smad7 mRNA 达显著增加(P<0.01);转化生长因子β、Ⅰ型胶原mRNA表达减少(P<0.01);Ⅲ型胶原mRNA表达差异无显著性意义(P>0.05).正常对照组、空质粒组smad7、转化生长因子β及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达差异无显著性意义(P值均>0.05).结论:大鼠Smad7真核表达质粒构建成功,外源Srnad7转染肝星状细胞T6细胞后可有效表达,并能降低转化生长因子β及Ⅰ型胶原mRNA表达水平. |
| 关 键 词： | 真核表达质粒 转染 肝星状细胞 |
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