| 短发夹RNA靶向抑制suvivin基因在人胶质瘤细胞U251中的表达 |
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| 引用本文： | 涂艳阳,徐如祥,王向宇,姜晓丹,封江南. 短发夹RNA靶向抑制suvivin基因在人胶质瘤细胞U251中的表达[J]. 中华神经医学杂志, 2006, 5(6): 579-582 |
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| 作者姓名： | 涂艳阳 徐如祥 王向宇 姜晓丹 封江南 |
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| 作者单位： | 1. 510282,广州,南方医科大学珠江医院神经外科、广东省神经医学研究所
2. 430074,湖北省武汉市晶赛生物工程技术有限公司 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30170961） |
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| 摘 要： | 目的构建表达靶向抑制survivin基因的三个短发夹结构(shRNA)的RNA干扰载体,使其在胶质瘤细胞发挥干扰效应。方法在survivin全长序列中选取设计3条19个核苷酸靶序列,2条反向重复序列,间以9个核苷酸的茎环序列,加上对应酶切位点,形成3条shRNA的DNA模板,分别克隆到3个干扰载体pG1,pG2和pG3上：采用分布酶切连接的方法,分别将U6启动子以及下游的后2个shRNA模板酶切下来,依次连接到pG1对应酶切位点,构建出含有3条shRNA模板且能独立编码shRNA的重组干扰载体pGenesil-survivin,测序鉴定：将干扰质粒导入到胶质瘤细胞U251,分别采用RT-PCR以及Western Bloting从mRNA和蛋白水平检测干扰后效果。结果重组的干扰载体含有3条正确的shRNA模板；RT-PCR以及Western Blotting检测显示,survivin的mRNA转录水平以及蛋白水平的表达均得到显著抑制。结论编码3条shRNA的干扰载体pGenesil-survivin介导的RNA干扰技术(RNAi)可以显著的靶向抑制survivin基因在人胶质瘤细胞U251中的表达。
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| 关 键 词： | 短发夹RNA Survivin基因 神经胶质瘤 |
| 文章编号： | 1671-8925（2006）06-579-004 |
| 收稿时间： | 2005-12-29 |
| 修稿时间： | 2005-12-29 |
Silencing of survivin in glioma cell line U251 by short hairpin RNA expression vector pGenesil-survivin targeting survivin |
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| TU Yan-yang,XU Ru-xiang,WANG Xiang-yu,JIANG Xiao-dan,FENG Jiang-nan. Silencing of survivin in glioma cell line U251 by short hairpin RNA expression vector pGenesil-survivin targeting survivin[J]. Chinese Journal of Neuromedicine, 2006, 5(6): 579-582 |
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| Authors: | TU Yan-yang XU Ru-xiang WANG Xiang-yu JIANG Xiao-dan FENG Jiang-nan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Short haipin RNA Survivin gene Glioma |
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