| Fas死亡信号激发域cDNA的克隆、表达及体外生物学效应 |
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| 引用本文： | 冯晓勤,周淑芸,宁运山,马骊,王小宁. Fas死亡信号激发域cDNA的克隆、表达及体外生物学效应[J]. 中国免疫学杂志, 2003, 19(9): 599-601,610 |
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| 作者姓名： | 冯晓勤 周淑芸 宁运山 马骊 王小宁 |
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| 作者单位： | 第一军医大学,广州,510515 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金课题资助 (No .980 2 2 2 ) |
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| 摘 要： | 目的：克隆及表达Fas死亡信号激发域(Fas Activation Domain，FasAD)片段，获得具有生物学活性的FasAD多肽。方法：应用半巢式逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增Fas死亡信号激发域cDNA片段，构建Intein表达型原核表达载体FasAD-pTYB12，应用IMPACT^TM-CN系统表达及进行一步法亲合层析分离、纯化FasAD多肽。结果：DNA序列测定显示克隆的FasAD cDNA碱基排列顺序与Genebank(M67454)所示完全一致。重组表达载体FasAD-pTYB12经IPTG诱导，成功表达可溶性融合蛋白，进一步分离、纯化获得分子量约5000的FasAD多肽，Westem blot显示FasAD多肽能被兔抗人Fas多抗识别。初步的生物学活性鉴定显示，该FasAD多肽抑制rhFasL诱导的细胞凋亡的生物学活性最高可达70％。结论：可利用IMPACT^TM-CN系统制备Fas死亡信号激发域的小分子量多肽，为深入研究Fas结构与功能的关系及与配体的相互作用提供了相关的实验基础，为进一步开发相关的生物免疫调节剂提供了实验依据。
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| 关 键 词： | Fas死亡信号激发域 cDNA 克隆 表达 体外生物学效应 |
| 文章编号： | 1000-484X(2003)09-0599-04 |
The cloning,expression and bioactivity of Fas activation domain |
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| FENG Xiao Qin,ZHOU Shu Yun,NING Yun Shan et al. The cloning,expression and bioactivity of Fas activation domain[J]. Chinese Journal of Immunology, 2003, 19(9): 599-601,610 |
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| Authors: | FENG Xiao Qin ZHOU Shu Yun NING Yun Shan et al |
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| Affiliation: | FENG Xiao Qin,ZHOU Shu Yun,NING Yun Shan et al.The First Military Medical University,Guangzhou 510515,China[ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Fas activation domain IMPACT TM CM system Gene recombination |
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