| AF-2结构域突变的SF1酵母表达质粒的构建及其与PNRC相互作用分析 |
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| 引用本文： | 陈彬,陈敏,李渝萍,陈健,周度金.AF-2结构域突变的SF1酵母表达质粒的构建及其与PNRC相互作用分析[J].第三军医大学学报,2003,25(7):614-616. |
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| 作者姓名： | 陈彬 陈敏 李渝萍 陈健 周度金 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金委“两个基地建设”专项资助项目 ( 9910 76 194 6 )，国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 0 70 359) |
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| 摘 要： | 目的 探讨激活功能-2(AF-2)结构域在孤儿核受体辅活化富含脯氨酸的受体辅调节蛋白(PNRC)相互作用的意义。方法 采用PCR和DNA重组技术构建了野生型SF1和AF-2结构域突变的SF1的酵母表达质粒pGBT9-SF1／HBDD和pGBT9-SF1／HBD／AF-2 del并采用酵母双杂合分析比较了它们与PNRC的相互作用强弱。结果 SF1／HBD能与野生型PNRC及其N-末端缺失突变体PNRC270-327，PNRC278-300产生较强的相互作用，而AF-2缺失的SF1／HBD不与这些PNRC片段发生相互作用。结论 功能性的AF-2结构域是SF1与PNRC相互作用所必须的。
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| 关 键 词： | 类固醇生成因子1 富含脯氨酸的核受体辅调节蛋白 辅活化子 激活功能-2 |
| 文章编号： | 1000-5404(2003)07-0614-03 |
| 修稿时间： | 2002年1月20日 |
Construction of yeast expression plasmids of SF1 with or without AF-2 domain and as-says for its interaction with PNRC |
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| CHEN Bin,CHEN Min,LI Yu ping,CHEN Jian,ZHOU Du jin.Construction of yeast expression plasmids of SF1 with or without AF-2 domain and as-says for its interaction with PNRC[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2003,25(7):614-616. |
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| Authors: | CHEN Bin CHEN Min LI Yu ping CHEN Jian ZHOU Du jin |
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| Abstract: | Objective To investigate the role of AF 2(Activation function 2)domain in the interaction between SF1 (Steroidogenic factor 1) and nuclear receptor coactivator PNRC (Proline rich nuclear receptor coregulatory protein). Methods The yeast expression plasmids of SF1/HBD and AF 2 domain deleted SF1/HBD were constructed and tested for interaction with PNRC. Results SF1/HBD interacted strongly with wild type of PNRC and its N terminus deletion mutants(PNRC 278 300 and PNRC 270 327), but SF1/HBD with deleted AF 2 domain could not. Conclusion The results suggest that functional AF 2 domain is required for the interaction between PNRC and SF1. |
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| Keywords: | proline rich nuclear receptor coregulatory protein steroidogenic factor 1 activation function 2 domain coactivator |
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