香菇C91-3转录组Unigene 28447基因的蛋白表达及其对细胞凋亡和周期的影响

[摘要]　目的〖ＨＴＫ〗　克隆香菇C91-3转录组中Unigene 28447基因，对其进行生物信息学分析，并研究该基因结构域的生物学活性。　方法　提取香菇C91-3菌丝体中的总RNA，用3′-Full RACE、5′-Full RACE方法获得香菇菌丝体Unigene 28447基因全长；构建基因表达载体，进行原核诱导表达，将表达蛋白进行纯化、复性。运用MTT法、流式细胞仪法研究蛋白对肿瘤细胞生长、周期及凋亡的影响。　结果　成功构建重组质粒pET32a（+）-Unigene，诱导重组蛋白表达，并进行纯化、复性。MTT法显示不同浓度蛋白对肿瘤细胞的生长抑制作用与对照组比较差异均有显著性意义（P<0.05），流式细胞仪显示此蛋白具有诱导肿瘤细胞改变周期和凋亡的作用（P<0.05）。　结论　初步鉴定Unigene 28447基因的结构域具有抗肿瘤活性。