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| 慢病毒介导的RNA干扰HMGA2基因表达对HL-60细胞增殖及细胞周期素B2、A2表达的影响 | |
| 引用本文： | 刘文丹,谭丽,熊喜峰,梁叶萍,谭获.慢病毒介导的RNA干扰HMGA2基因表达对HL-60细胞增殖及细胞周期素B2、A2表达的影响[J].中华血液学杂志,2012,33(6):448-452. |
| 作者姓名： | 刘文丹 谭丽 熊喜峰 梁叶萍 谭获 |
| 作者单位： | 1. 广州医学院第一附属医院海印院区肿瘤血液中心,510230 2. 广州医学院组织学与胚胎学教研室 3. 广东省泌尿外科重点实验室 |
| 摘 要： | 目的 探讨慢病毒介导的RNA干扰沉默高迁移率族蛋白A2(HMGA2)基因表达对人急性白血病细胞系HL-60细胞增殖及细胞周期素(cyclin) B2、cyclin A2表达的影响.方法 制备表达HMGA2基因短发夹RNA(shRNA)的重组慢病毒载体,转染HL-60细胞.通过半定量RT-PCR和Western blot检测特异性shRNA转染后HL-60细胞HMGA2基因表达;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术(FCM)检测细胞周期; RT-PCR及Western blot检测cyclin B2、cyclin A2 mRNA和蛋白表达水平.结果 RT-PCR和测序证实,成功构建了表达HMGA2 shRNA的重组慢病毒载体;RT-PCR和Western blot证实经嘌呤霉素筛选出的阳性克隆转染的HL-60细胞HMGA2 mRNA和蛋白表达水平与空载体组相比明显受抑,抑制率分别达(80.66 ± 7.98)%和(76.35±12.72)%;CCK-8比色结果显示,HMGA2表达受到稳定干扰的HL-60细胞增殖活力明显受到抑制,细胞增殖曲线低平,缺乏指数增殖特征.FCM检测显示,与对照组相比,转染特异性shRNA的HL-60细胞出现了明显的G2/M期阻滞,G2/M期细胞分别为(13.90±4.07)%和(30.00±5.78)%(P<0.05).HMGA2特异性shRNA转染的HL-60细胞cyclin B2 mRNA和蛋白表达与未转染细胞相比,抑制率分别为(67.55±7.69)%和(51.77±4.81)%(P<0.01).而cyclin A2的表达无明显改变.结论 HMGA2基因沉默可下调cyclin B2表达,从而使细胞出现明显的增殖抑制和G2/M期阻滞. |
| 关 键 词： | 基因 HMGA2 RNA干扰 细胞增殖 细胞系 HL-60 |
The effects of lentivirus-mediated RNA interference silencing HMGA2 on proliferation and expressions of cyclin B2 and cyclin A2 in HL-60 cells |
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| LIU Wen-dan , TAN Li , XIONG Xi-feng , LIANG Ye-ping , TAN Huo.The effects of lentivirus-mediated RNA interference silencing HMGA2 on proliferation and expressions of cyclin B2 and cyclin A2 in HL-60 cells[J].Chinese Journal of Hematology,2012,33(6):448-452. | |
| Authors: | LIU Wen-dan TAN Li XIONG Xi-feng LIANG Ye-ping TAN Huo |
| Institution: | Center of Oncology and Hematology, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou 510230, China. |
| Abstract: | |
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