| 改良兔角膜上皮细胞原代培养及纯化的方法 |
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| 引用本文： | 石妍,杨帆,葛红岩,刘平.改良兔角膜上皮细胞原代培养及纯化的方法[J].眼科新进展,2010,30(7). |
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| 作者姓名： | 石妍 杨帆 葛红岩 刘平 |
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| 作者单位： | 哈尔滨医科大学第一临床医学院眼科医院,黑龙江省哈尔滨市,150001 |
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| 基金项目： | 黑龙江省科技攻关课题基金，黑龙江省教育厅课题基金 |
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| 摘 要： | 目的 改良原代培养及纯化兔角膜上皮细胞的方法,提高角膜上皮细胞原代培养的成功率.方法 采用全角膜组织培养法培养兔角膜上皮细胞,利用机械刮除和差速贴壁法进行纯化并传代,通过倒置显微镜对细胞进行形态学观察并应用免疫组织化学的方法对细胞进行鉴定.结果 兔全角膜24 h贴壁,48 h后即可见有细胞自角膜缘爬出,5d后细胞大量爬出可见成纤维细胞和角膜上皮细胞共存,界限明显;角膜上皮细胞复层生长.在界限融合前刮除成纤维细胞,角膜上皮细胞继续旺盛生长,10 d后达到融合.兔角膜上皮细胞传至第4代后细胞体积明显变大,传至第5代,细胞衰老、凋亡.兔角膜上皮细胞免疫组织化学显示PCK单克隆抗体阳性.结论 改良原代培养及纯化兔角膜上皮细胞的方法简单、经济、有效,并可获得具有良好生物学特性的角膜上皮细胞,为角膜及角膜疾病的研究奠定实验基础.
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| 关 键 词： | 角膜上皮细胞 全角膜 原代细胞培养 纯化 兔 |
Improved method of primary culture and purification of rabbit corneal epithelial cells |
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| SHI Yan,YANG Fan,GE Hong-Yan,LIU Ping.Improved method of primary culture and purification of rabbit corneal epithelial cells[J].Recent Advances in Ophthalmology,2010,30(7). |
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| Authors: | SHI Yan YANG Fan GE Hong-Yan LIU Ping |
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