| TRAIL诱导HBV转染肝癌细胞BEL-7402凋亡的作用及机制研究 |
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| 引用本文： | 张秋,孙汶生,马春红,高立芬,刘素侠,王晓燕,张利宁,陈有海.TRAIL诱导HBV转染肝癌细胞BEL-7402凋亡的作用及机制研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2005,25(5):357-362. |
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| 作者姓名： | 张秋 孙汶生 马春红 高立芬 刘素侠 王晓燕 张利宁 陈有海 |
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| 作者单位： | 1. 250012,济南,山东大学医学院免疫学研究所
2. 美国宾州大学人类基因治疗研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金委海外青年学者合作研究基金 (3 0 12 80 2 3 )，博士学科点专项科研基金 (2 0 0 3 0 42 2 0 5 6) |
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| 摘 要： | 目的 研究肝癌细胞BEL- 74 0 2感染HBV前后,TRAIL诱导其凋亡的敏感度变化及作用机制。方法 构建含1.1倍HBV全基因组的真核表达载体pcDNA3 1.1HBV ,转染人肝癌细胞BEL -74 0 2 ,G4 18稳定筛选,建立HBVadr亚型体外转染的细胞模型。原位末端标记(TUNEL)检测TRAIL诱导的凋亡反应,并通过设立TRAIL联合其可溶性受体sDR5 (sDR5与TRAIL结合后,可特异性阻断TRAIL诱导凋亡) ,以证实该凋亡是由TRAIL特异性诱导的。琼脂糖凝胶电泳(DNAladder)检测染色体DNA的断裂情况。流式细胞术、半定量逆转录聚合酶链反应检测HBV感染前后细胞表面TRAIL各受体的表达。双荧光素酶报告基因系统检测抑制凋亡的核转录因子NF κB的活性。结果 成功构建了包含HBV全基因组的真核表达载体pcDNA3 1.1HBV ,转染BEL 74 0 2、经G4 18稳定筛选后得到HBVadr亚型转染的细胞模型BEL 74 0 2 1.1HBV。TRAIL诱导BEL 74 0 2、BEL 74 0 2 pcDNA3及BEL 74 0 2 1.1HBV的凋亡率分别为30 .5 %、2 9.8%和76 % (P <0 .0 1) ;经sDR5特异性阻断后,凋亡率分别为0 .9%、0 .8%和0 .9% ,证明凋亡是由TRAIL特异性诱导的。TRAIL作用2 4h后,琼脂糖凝胶电泳可见BEL- 74 0 2 1.1H-BV较BEL- 74 0 2、BEL 74 0 2 pcDNA3染色体DNA断裂的现象更为明显。无论RNA水平还
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 肝癌 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 凋亡 |
| 修稿时间： | 2004年9月12日 |
The apoptosis of TRAIL induce hepatoma BEL-7402 transfected with HBV and its mechanism |
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| Zhang Qiu,SUN Wen-sheng,MA Chun-hong,GAO Li-fen,LIU Su-xia,WANG Xiao-yan,ZHANG Li-ning,CHEN You-hai.The apoptosis of TRAIL induce hepatoma BEL-7402 transfected with HBV and its mechanism[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2005,25(5):357-362. |
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| Authors: | Zhang Qiu SUN Wen-sheng MA Chun-hong GAO Li-fen LIU Su-xia WANG Xiao-yan ZHANG Li-ning CHEN You-hai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus Hepatoma Tumor necrosis factor r elated apoptosis inducing ligand (TRAIL) Apoptosis |
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