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肝细胞内与HBeAg结合的新蛋白编码基因E-36的筛选与克隆
引用本文:陆荫英,梁耀东,成军,邵清,陈天艳,王琳,张健,李克,张玲霞. 肝细胞内与HBeAg结合的新蛋白编码基因E-36的筛选与克隆[J]. 解放军医学杂志, 2003, 28(12): 1077-1079
作者姓名:陆荫英  梁耀东  成军  邵清  陈天艳  王琳  张健  李克  张玲霞
作者单位:100039,北京,解放军第302医院
基金项目:国家自然科学基金 (编号C39970 674、C0 30 1 1 4 0 2、C30 0 70 689、3990 0 1 30 ),军队“十五”科技攻关青年基金 (编号 0 1Q1 38),军队“十五”科技攻关面上项目(编号 0 1MB1 35),军队留学归国人员启动基金 (编号 98H0 38)资助课题
摘    要:目的 探讨HBeAg在乙型肝炎病毒 (HBV)致病过程中所起的作用。方法 利用酵母双杂交系统 3筛选并克隆人肝细胞cDNA文库中与HBeAg有相互作用的蛋白的基因。将HBeAg编码基因克隆入酵母表达载体 pGBKT7中构建诱饵质粒 ,转化酵母细胞AH10 9并在其内表达 ,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合 ,双重筛选阳性菌落 ,提取质粒并测序。结果 通过行生物信息学分析 ,发现其中有 1个未知基因 ,命名为E 36。结论 根据GenBank中的序列信息设计引物 ,从HepG2细胞中扩增出E 36新基因的完整序列并克隆到另一酵母表达载体pGADT7中 ,并用体外免疫共沉淀方法再次验证了HBeAg与E 36新蛋白之间有结合作用 ,为HBeAg的功能研究提供了新线索。

关 键 词:肝炎E抗原  乙型  基因  双杂交系统技术
修稿时间:2003-04-08

SCREENING AND IDENTIFICATION OF A NOVEL HEPATITIS B VIRUS E ANTIGEN BINDING PROTEIN E-36 FROM HEPATOCYTE cDNA LIBRARY
LU Yin-ying,LIANG Yao-dong,CHENG Jun et al. Hospital of PLA,Beijing ,China. SCREENING AND IDENTIFICATION OF A NOVEL HEPATITIS B VIRUS E ANTIGEN BINDING PROTEIN E-36 FROM HEPATOCYTE cDNA LIBRARY[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2003, 28(12): 1077-1079
Authors:LU Yin-ying  LIANG Yao-dong  CHENG Jun et al. Hospital of PLA  Beijing   China
Affiliation:LU Yin-ying,LIANG Yao-dong,CHENG Jun et al. 302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China
Abstract:
Keywords:hepatitis B e antigens  genes  two-hybrid system techniques
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