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| 端粒酶逆转录酶基因hTERT突变表达载体在膀胱癌细胞T24中的表达 | |
| 引用本文： | 符伟军,黄君健,白云秀,严友农,徐兵,邵国兴,王禾,黄翠芬.端粒酶逆转录酶基因hTERT突变表达载体在膀胱癌细胞T24中的表达[J].第四军医大学学报,2002,23(2):122-125. |
| 作者姓名： | 符伟军 黄君健 白云秀 严友农 徐兵 邵国兴 王禾 黄翠芬 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 2. 沈阳军,区202医院泌尿外科 3. 第四军医大学西京医院泌尿外科 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 39870 783)，国家 973资助项目 ( G2 0 0 0 0 5 70 0 1) |
| 摘 要： | 目的 构建端粒酶逆转录酶基因（hTERT）缺失突变的真核表达载体pEGFP-hTERT，并转孜膀胱癌细胞株T24中，观察其稳定表达，探讨其对端粒酶性调控机制及成为膀胱肿瘤基因治疗新靶点的可能性，方法 将PCR扩增的hTERT缺失突变体片段用EcoRⅠ与SalⅠ酶切，并连接到真核表达载体pEGFP-C1上，构建成hTERT缺失突变的真核表达载体pEGFP-hTERT；利用DNA－磷酸钙共沉淀法将pEGFP-hTERT导入膀胱癌细胞株T24中，应用荧光显微镜、与衰老相关的β－半乳糖苷酶染色等方法观察转染细胞中hTERT-GFP融合蛋白定位表达及对膀胱癌细胞生长的影响。结果 酶切鉴定证实hTERT缺失突变体体已克隆到pEGFP-C1的EcoRⅠ与SalⅠ位点之间，在转染细胞中观察到与其融合的绿色荧光蛋白的稳定表达，定位于细胞核内；转染细胞2wk后与衰老相关β－半乳糖苷酶表达增加，细胞生长受抑制。结论 构建的端粒酶逆转录酶基因hTERT缺失突变真核表达载体pEGFP-hTERT可在膀胱癌细胞T24中稳定表达。突变型hTERT蛋白可入细胞核中竞争性影响端粒酶的功能，进而抑制膀胱癌细胞的生长。 |
| 关 键 词： | 膀胱肿瘤 端粒 转染 hTERT 端粒酶 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-2790(2002)02-0122-04 |
| 修稿时间： | 2001年6月19日 |
Construction of recombinant vector of a mutant hTERT and its expression in human bladder carcinoma cell line T24 |
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| FU Wei Jun ,HUANG Jun Jian ,BAI Yun Xiu ,YAN You Nong ,XU Bing ,SHAO Guo Xing ,WANG He ,HUANG Cui Fen Biological Engineering Research Institute,Academy of Military Medical Sciences,Beijing ,China,De.Construction of recombinant vector of a mutant hTERT and its expression in human bladder carcinoma cell line T24[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2002,23(2):122-125. | |
| Authors: | FU Wei Jun HUANG Jun Jian BAI Yun Xiu YAN You Nong XU Bing SHAO Guo Xing WANG He HUANG Cui Fen Biological Engineering Research Institute Academy of Military Medical Sciences Beijing China De |
| Institution: | FU Wei Jun 1,HUANG Jun Jian 1,BAI Yun Xiu 1,YAN You Nong 2,XU Bing 1,SHAO Guo Xing 3,WANG He 3,HUANG Cui Fen 1 1Biological Engineering Research Institute,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China,2De |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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