| 视神经慢性损伤相关差异表达cDNA文库的鉴定与分析 |
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| 引用本文： | 吕立权,楼美清,董艳,蔡如珏,胡国汉,骆纯,侯立军,卢亦成.视神经慢性损伤相关差异表达cDNA文库的鉴定与分析[J].第二军医大学学报,2008,29(8):0934-0939. |
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| 作者姓名： | 吕立权 楼美清 董艳 蔡如珏 胡国汉 骆纯 侯立军 卢亦成 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长征医院神经外科,上海市神经外科研究所,上海,200003 |
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| 摘 要： | 目的:对构建的猫视神经慢性损伤相关差异表达cDNA文库进行初步克隆、鉴定和分析.方法:用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行cDNA文库扩增和蓝白斑筛选,每个文库随机挑取300个白色克隆用菌落PCR进行鉴定.对阳性克隆菌落进行DNA测序以获得差异表达基因片段序列.将测序所得的序列通过互联网用Blast程序查找日本国家DNA数据库进行同源性分析.用实时定量PCR验证差异克隆.结果:PCR鉴定获得1000个阳性菌落,测序获得674个EST片段,序列长度在200～800 bp之间.同源性分析结果提示4周正向文库得到14个同源基因,4周反向文库得到20个同源基因,8周正向文库得到23个同源基因,8周反向文库得到19个同源基因.这些基因可归类于能量代谢、物质转运、信号转导、基因转录、细胞损伤与修复、MHC分子等.实时定量PCR检测的4个克隆证实是差异表达序列.结论:本研究构建的视神经慢性损伤相关差异表达cDNA文库为进一步鉴定和研究慢性视神经损伤相关基因提供了实验基础.
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| 关 键 词： | 慢性视神经损伤 cDNA文库 基因表达 |
| 收稿时间： | 12/8/2007 4:24:40 PM |
| 修稿时间： | 2008/6/12 0:00:00 |
Identification and analysis of subtracted cDNA library of differentially expressed genes associated with chronic optic nerve injury |
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| Lv Li-quan,LOU Mei-qing,DONG Yan,CAI Ru-jue,HU Guo-han,LUO Chun,HOU Li-jun,LU Yi-cheng.Identification and analysis of subtracted cDNA library of differentially expressed genes associated with chronic optic nerve injury[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2008,29(8):0934-0939. |
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| Authors: | Lv Li-quan LOU Mei-qing DONG Yan CAI Ru-jue HU Guo-han LUO Chun HOU Li-jun LU Yi-cheng |
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| Institution: | L(U) Li-quan,LOU Mei-qing,DONG Yan,CAI Ru-jue,HU Guo-han,LUO Chun,HOU Li-jun,LU Yi-cheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chronic optic nerve injury cDNA library gene expression |
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