乳腺癌T细胞受体α链全长编码序列多重PCR扩增方法的建立 |
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引用本文: | 张建波,吕晓东,楚广民,宋魏,冯稳,刘明阁,于庆凯.乳腺癌T细胞受体α链全长编码序列多重PCR扩增方法的建立[J].河南医学研究,2014,23(11):5-8. |
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作者姓名: | 张建波 吕晓东 楚广民 宋魏 冯稳 刘明阁 于庆凯 |
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作者单位: | 郑州大学附属肿瘤医院 病理科 河南郑州 450003 |
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基金项目: | 河南省基础与前沿技术研究计划项目 |
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摘 要: | 目的:建立乳腺癌克隆性T细胞TCRα链全长编码序列(CDS)的多重PCR扩增方法。方法:根据Gen Bank现有TCR序列设计扩增TCRα链32个亚家族上游引物35条,下游引物2条。对Mg2+、d NTPs和引物浓度比例以及退火温度进行优化,确定最佳反应体系进行TCRα链多重PCR扩增,构建重组质粒并酶切鉴定。结果:扩增出乳腺癌转移淋巴结中的TCRα链全长编码序列并构建重组质粒,5例患者共获得23个阳性克隆。结论:建立的TCRα链多重PCR扩增方法具有特异、快速、简便的特点,可为研究乳腺癌克隆性T细胞提供帮助。
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关 键 词: | T细胞受体 多重PCR 质粒 |
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