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| 抗人Cyclin D1人源单链抗体AD9的表达及活性分析 | |
| 引用本文： | 曹玉华,李善玉,陈勇,邹德生,田宇,郝东云,李桂英. 抗人Cyclin D1人源单链抗体AD9的表达及活性分析[J]. 中国实验诊断学, 2008, 12(8) |
| 作者姓名： | 曹玉华 李善玉 陈勇 邹德生 田宇 郝东云 李桂英 |
| 作者单位： | 1. 分子酶学工程教育部重点实验室(吉林大学),吉林,长春,130021 2. 吉林大学第一医院,儿科,吉林,长春,130021 3. 吉林大学中日联谊医院,神经外科,吉林,长春,130033 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，吉林省科技发展计划，吉林省杰出青年科学基金 |
| 摘 要： | 目的 原核表达、纯化抗人cyclin D1人源单链抗体(AD9)并对其活性进行分析.方法 将含有AD9基因片段的噬菌粒转化大肠杆菌HB2151后,IPTG诱导表达,ELISA鉴定培养上清具有与cyclin D1蛋白结合活性后,经硫酸铵沉淀,His Trap HP亲和纯化,获得抗人cyclin D1人源单链抗体(AD9),进一步利用ELISA和Western blot对其进行鉴定和活性分析.结果 IPTG诱导AD9可溶性表达,培养上清经硫酸铵沉淀和亲和纯化后,获得纯度达95%的单链抗体蛋白,ELISA和Western blot结果表明,诱导上清及纯化的AD9均能够与人Cyclin D1蛋白有特异性结合,AD9的分子量约为30 kDa.结论 成功地可溶性表达和纯化了,具有较好的结合人Cyclin D1蛋白活性的抗人Cyclin D1人源单链抗体. |
| 关 键 词： | 人Cyclin D1蛋白 单链抗体 表达 纯化 |
Expression and identification of anti-Cyclin D1 human single-chain variable fragments antibody against cyclinD1 (AD9) |
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