| 改良PCR-ELISA的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 郭晏海,张菊,崔大祥,赵锦荣,闫小君. 改良PCR-ELISA的建立及初步应用[J]. 临床检验杂志, 2002, 20(4): 211-213 |
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| 作者姓名： | 郭晏海 张菊 崔大祥 赵锦荣 闫小君 |
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| 作者单位： | 第四军医大学全军基因诊断技术研究所,西安,710033 |
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| 摘 要： | 目的 建立操作简单、灵敏、特异的PCR -ELISA。方法 采用短DNA片段扩增 ,其中上游引物 5′端标记有生物素 ,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素 ,随着PCR反应的结束 ,PCR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交 ,形成杂交产物 ,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合 ,被固定在微孔板上 ,最后用ELISA检测被固定的杂交产物。结果 该方法可以检测出 1× 10 1拷贝的HBVDNA模板 ,对 10 0例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清 10 0 %(30 /30 )检出HBVDNA ;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清HBVDNA阳性为 78 6 %(2 2 /2 8) ;HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清HBVDNA阳性为 6 6 7%(16 /2 4) ,其余为阴性。非乙型肝炎血清的结果均为阴性。结论 该PCR -ELISA操作简单 ,方法灵敏、特异。
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| 关 键 词： | 改良PCR－ELISA 酶联免疫吸附分析 基因诊断 乙型肝炎 |
| 文章编号： | 1001-764X(2002)04-0211-03 |
| 修稿时间： | 2001-10-08 |
PCR-ELISA with amplification and hybridization in same tube for detect ing HBV DNA in serum |
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| GUO Yanhai,ZHANG Ju,CUI Daxiang,el al.. PCR-ELISA with amplification and hybridization in same tube for detect ing HBV DNA in serum[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2002, 20(4): 211-213 |
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| Authors: | GUO Yanhai ZHANG Ju CUI Daxiang el al. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | polymerase chain reaction ELISA liquid-hybridization |
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