| 人可溶性4-1BBL在毕氏酵母中的表达及其协同刺激效应的研究 |
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| 引用本文： | 沈丽琴,徐 颖,黄伟达,邓忠彬,古 涛,马泓冰,张学光.人可溶性4-1BBL在毕氏酵母中的表达及其协同刺激效应的研究[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2003,10(1):17-20. |
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| 作者姓名： | 沈丽琴 徐 颖 黄伟达 邓忠彬 古 涛 马泓冰 张学光 |
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| 作者单位： | 1. 苏州大学生物技术研究所,江苏,苏州,215007
2. 上海复旦大学生化系,上海,200433 |
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| 基金项目： | 国家重大基础研究项目 (2 0 0 0 1CB5 10 0 3 )资助 |
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| 摘 要： | 目的：通过甲醇营养型毕氏酵母蛋白质表达系统，表达出具有生物活性的人可溶性4－1BBL重组蛋白。方法：PCR方法从XG－4－1BBL转基因细胞中获得4－1BBL的胞外段基因；利用酵母表达载体pPICZαA构建重组质粒pPICZαA－s4-1BBL,经线性化后电转化导入毕氏酵母GS115中，甲醇诱导表达；SDS－PAGE蛋白电泳和Western blot分析发酵上清中hs4－1BBL蛋白表达水平及其特异性；体外T细胞增殖试验（^3H-TdR掺入法）观察rhs4－1BBL蛋白的生物学活性。结果：（1）成功地扩增到4－1BBL的胞外段基因，酶切鉴定及测序结果与已知的基因序列一致；（2）SDS－PAGE蛋白电泳和Western blot结果显示所获重组蛋白的分子量与预期分子量（21kD)相同，并可被4－1BBL特异性抗体识别；（3）重组蛋白在体外具有协同促进T细胞增殖的效应。结论：成功地在毕氏酵母表达系统中表达出具有生物学活性的人可溶性4－1BBL重组蛋白，为进一步研究其功能奠定了物质基础。
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| 关 键 词： | 人可溶性4－1BBL 毕氏酵母 表达 协同效应 |
| 文章编号： | 1007-385X(2003)01-0017-04 |
| 收稿时间： | 2002/10/21 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2002年10月21 |
Expression of Recombinant Human Soluble 4-1BBL in Yeast Pichia Pastoris and It′s Costimulating Activity on T Cells |
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| SHEN Li-qin,XU Ying,HUANG Wei-d,DENG Zhong-bing,GU Tao,MA Hong-bing and ZHANG Xue-guang.Expression of Recombinant Human Soluble 4-1BBL in Yeast Pichia Pastoris and It′s Costimulating Activity on T Cells[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2003,10(1):17-20. |
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| Authors: | SHEN Li-qin XU Ying HUANG Wei-d DENG Zhong-bing GU Tao MA Hong-bing and ZHANG Xue-guang |
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| Institution: | Institute of Biotechnology of Suzhou University, Suzhou 215007;Institute of Biotechnology of Suzhou University, Suzhou 215007;Department of Biochemistry, Fudan University, Shanghai 200433, China;Institute of Biotechnology of Suzhou University, Suzhou 215007;Institute of Biotechnology of Suzhou University, Suzhou 215007;Institute of Biotechnology of Suzhou University, Suzhou 215007;Institute of Biotechnology of Suzhou University, Suzhou 215007 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hs4 1BBL Pichia pastoris expression costimulating activity |
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