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应用长链RT-PCR法扩增我国登革2、4型病毒株全长cDNA
引用本文:范宝昌,赵卫,胡志君,陈水平,于曼,秦鄂德,杨佩英.应用长链RT-PCR法扩增我国登革2、4型病毒株全长cDNA[J].中华微生物学和免疫学杂志,2002,22(5):485-488.
作者姓名:范宝昌  赵卫  胡志君  陈水平  于曼  秦鄂德  杨佩英
作者单位:100071,北京,军事医学科学院微生物流行病研究所
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (3 0 0 0 0 14 4)
摘    要:目的:采用长链RT-PCR技术扩增登革2型及4型病毒基因组全长cDNA,为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达,深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础。方法:根据已测定的登革2、4型病毒全基因组序列,设计上下游引物。从感染登革病毒的乳鼠脑中提取病毒基因组RNA,采用长链RT-PCR技术进行扩增。为检验扩增产物的特异性,以PCR产物为模板扩增覆盖基因组的10个片段。将含有复杂二级结构的5′非编码区扩增片段,在377A型自动测序仪进行序列分析。结果:扩增出登革2、4型病毒基因组全长近11kb cDNA分子,非编码区测序结果表明扩增产物为登革2、4型病毒所特有。结论:利用长链RT-PCR首次成功扩增出登革病毒全长cDNA分子。

关 键 词:登革病毒  全长cDNA  长链RT-PCR法  发病机制  登革热  基因克隆  基因表达
修稿时间:2001年10月29

Amplification of full-length cDNA of dengue virus type 2 and 4 by long RT-PCR
FAN Baochang,ZHAO Wei,HU Zhijun,CHEN Shuiping,YU Man,QIN Ede,YANG Peiying.Amplification of full-length cDNA of dengue virus type 2 and 4 by long RT-PCR[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2002,22(5):485-488.
Authors:FAN Baochang  ZHAO Wei  HU Zhijun  CHEN Shuiping  YU Man  QIN Ede  YANG Peiying
Institution:FAN Baochang,ZHAO Wei,HU Zhijun,CHEN Shuiping,YU Man,QIN Ede,YANG Peiying. Institute of Microbiology and Epidemiology,Acadamy of Military Medical Sciences,Beijing 100071,China [
Abstract:
Keywords:Dengue virus  Full  length cDNA  Long RT  PCR
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