靶向沉默miR-345表达对胃癌细胞周期的影响及其机制 |
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引用本文: | 李博,马俊,郭婉薇,陈晓武,王伟福,柳勤译,蔡少薇,叶丽芳,杨夏彤,王丽萍,许鸣.靶向沉默miR-345表达对胃癌细胞周期的影响及其机制[J].胃肠病学和肝病学杂志,2015(4):398-401. |
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作者姓名: | 李博 马俊 郭婉薇 陈晓武 王伟福 柳勤译 蔡少薇 叶丽芳 杨夏彤 王丽萍 许鸣 |
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作者单位: | 广东省第二人民医院消化科;佛山市第二人民医院消化科 |
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基金项目: | 广东省科技计划资助项目(2012B061700026) |
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摘 要: | 目的探讨miR-345影响胃癌细胞生长周期的作用机制。方法采用脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45以沉默miR-345表达,采用实时英光定量PCR(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)检测胃癌细胞中p21Cip1水平,随后检测CDK4、CDK6、Cyclin D1、p-Rb、Rb蛋白水平,进一步克隆形成实验比较其增殖能力,流式细胞术检测miR-345对胃癌细胞周期的影响。结果脂质体介导转染miR-345反义寡核苷酸至胃癌细胞MGC803、MKN45可以抑制miR-345的表达;p21Cip1的mRNA和蛋白水平在低miR-345表达的胃癌细胞系中升高;下调miR-345的表达后MGC803、MKN45细胞中CDK4、CDK6、Cyclin D1和总Rb蛋白的表达水平无明显变化,但Rb蛋白的磷酸化水平显著降低。结论沉默miR-345的表达能够明显阻滞胃癌细胞从G1期向S期的进程,减慢细胞生长速度;其机制与上调p21Cip1进而抑制Rb蛋白的磷酸化有关。
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关 键 词: | 微小RNA 胃癌 细胞周期 miR-345 |
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