应用假病毒模型寻找H5NI高致病流感病毒侵入抑制剂

目的：建立不同亚型流感病毒侵入环节的细胞水平重组病毒药理筛选模型，并应用该模型筛选流感病毒侵入抑制剂。方法：将表达流感病毒外壳蛋白（hemagglutinin，HA）质粒和HIV-1核心基因共转染至病毒生成细胞，生成由HA包装HIV核心的重组病毒颗粒，简称HA／HIV模型，HIV-1核心基因上携带的报告基因的表达水平可以反映感染水平。在筛选过程中，以VSVG／HIV模型作为特异性对照模型，以HA抗体作为阳性对照。结果：成功构建了两种H5N1亚型和-种H5N2亚型的流感病毒侵入为靶标的药理筛选模型，HA抗体可以成功抑制HA／HIV假病毒颗粒的侵入。应用以上模型筛选了2000余个化合物，其中发现三个海洋来源的化合物YCUA-6、YC-72、GC-29可以剂量依赖性抑制三种不同亚型流感病毒HA介导的侵入，其IC50均在1～10μM之间。结论：目前针对流感病毒的侵入环节尚无有效的药物，本研究首次建立了以流感病毒侵入环节为靶标的药物筛选模型，发现三个海洋来源化合物单体YCUA-6、YC-72、GC-29可有效抑制H5N1高致病流感病毒的侵入，本研究提供了流感病毒侵入抑制剂的先导化合物，为研发新靶点和新结构类型的流感病毒抑制剂建立了筛选和物质平台。