| 乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用 |
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| 引用本文： | 陶志华,陈晓东,王忠永,周武,袁谦.乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR的建立与应用[J].临床检验杂志,2002,20(5):282-284. |
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| 作者姓名： | 陶志华 陈晓东 王忠永 周武 袁谦 |
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| 作者单位： | 温州医学院附属第一医院检验科,浙江温州,325000 |
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| 基金项目： | 温州市“5 5 1”人才培养计划，温州市科委资助课题 (S2 0 0 1A49) |
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| 摘 要： | 目的 建立血浆 (血清 )HBVDNA荧光定量PCR检测方法 ,探讨其临床应用价值。方法 用PUCm T载体和PCR纯化产物连接 ,转染DH5α菌 ,筛选阳性菌落 ,提取质粒 ,制作外标准品 ;在HBV基因组S区设计一对引物和TaqMan探针 ,严格优化反应物的组成和扩增条件 ,并对该方法进行评价。结果 建立的HBVDNA荧光定量PCR最低可检出 80 0拷贝 /ml;批内误差为 1 8%～ 6 5% ,批间误差为 2 6 %～ 9 1 % ;在 1 0 4 ～ 1 0 11拷贝 /ml之间与Ct值具有很好的线性 (Ct =- 1 .391 1ln(X) 4 1 .6 5,r =- 0 .9958) ;外周血HBVDNA临床定量检测发现 ,HBeAg阳性的 1 30例中 ,HBVDNA阳性率为 1 0 0 % ,含量为1 0 6 89± 1.6 9拷贝 /ml,抗HBe阳性的 96例中HBVDNA阳性率为 55 2 % ( 53/ 96 ) ,含量为 1 0 4 .0 9± 1.19拷贝 /ml;6 2例献血员未检出HBVDNA。乙肝临床治疗监测发现 ,外周血中HBVDNA含量检测可有效反映治疗效果 ,指导临床用药。结论 荧光定量PCR检测方法是一种相对准确、灵敏度高、特异性较强和较简便的HBVDNA定量检测技术 ,对乙肝诊断、指导临床用药和治疗监测方面具有实用价值
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| 关 键 词： | 荧光定量 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸 |
| 文章编号： | 1001-764X(2002)05-0282-03 |
| 修稿时间： | 2002年1月3日 |
Detection for HBV DNA in plasma by fluorescence quantitative polymerase chain reaction and its clinical applicability |
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| TAO Zhihu,CHEN Xiaodong,WANG Zhongyong,et al.Detection for HBV DNA in plasma by fluorescence quantitative polymerase chain reaction and its clinical applicability[J].Chinese Journal of Clinical Laboratory Science,2002,20(5):282-284. |
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| Authors: | TAO Zhihu CHEN Xiaodong WANG Zhongyong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HBV DNA fluorescence quantitative polymerase chain reaction |
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