白藜芦醇对TGF-β1诱导的肾小球足细胞转分化抑制作用研究

目的 研究白藜芦醇（Resveratrol）对转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）诱导的肾小球足细胞转分化的影响。方法 体外分化条件下培养小鼠足细胞10天，分为正常组、模型组和白藜芦醇高、低剂量组。白藜芦醇高、低剂量组分别用5、2 μmol/L白藜芦醇干预30 min后，模型组和干预组各用5 ng/mL TGF-β1继续诱导72 h，正常组常规培养。分别采用免疫细胞化学、流式细胞术、Western blot技术等检测足细胞表型蛋白分子上皮钙黏蛋白（E-cadherin）、胎盘钙黏蛋白（P-cadherin）、紧密连接蛋白 （zonula occludens-1，ZO-1）、肾小球足细胞相关蛋白1（NEPH1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin， α-SMA）表达。用蛋白滤过试验检测单层足细胞的蛋白滤过功能。结果 与正常组比较，模型组E-cadherin ＋细胞百分率、P-cadherin、ZO-1、NEPH1蛋白表达及蛋白浓度均显著降低（P〈0.05），α-SMA蛋白表达升高（P〈0.05），透过单层足细胞的蛋白浓度显著增高（P〈0.05）。与模型组比较，白藜芦醇高、低剂量组E-cadherin＋细胞百分率均升高（P〈0.05），透过单层足细胞的蛋白浓度均降低（P〈0.05）；白藜芦醇低剂量组P-cadherin及 NEPH1蛋白表达均升高（P〈0.05）；白藜芦醇高剂量组P-cadherin、ZO-1及NEPH1蛋白表达均升高，α-SMA蛋白表达降低（P〈0.05）。白藜芦醇浓度与E-cadherin＋、P-cadherin及NEPH1蛋白表达水平呈显著正相关（rE-cadherin＋=0.772，rP-cadherin=0.756，r NEPH1=0.809，P〈0.05）。结论 白藜芦醇显著抑制TGF-β1诱导的足细胞表型异常可能是其维持肾小球滤过屏障的完整性，降低蛋白尿的重要机制。