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帕金森病相关蛋白α-共核蛋白的可溶性表达、纯化及抗体制备
引用本文:黄银霞,韩俊,张晓光,姚海兰,王小凡,张瑾,张宝云,董小平.帕金森病相关蛋白α-共核蛋白的可溶性表达、纯化及抗体制备[J].中国老年学杂志,2006,26(2):201-204.
作者姓名:黄银霞  韩俊  张晓光  姚海兰  王小凡  张瑾  张宝云  董小平
作者单位:中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京,100052
基金项目:国家自然科学基金;国家自然科学基金;新材料领域项目;欧盟资助项目;国家科技攻关项目
摘    要:目的 利用分子克隆接术在愿核细胞中表达α-共核蛋白(SNCP),并制备免多克隆抗体。方法 从人神母经细胞SH-SY5Y细胞中提取总RNA,逆转录成cDNA。利用PCR技术扩增获得SNCP的cDNA序列,测序正确后克隆至pQE-30-GST表达载体上,在大肠埃希菌中表达GST-SNCP融合蛋白。融合蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,制备特异性抗血清,并对该抗体进行检测。结果 琼脂糖凝胶电泳显示获得SNCP cD-NA序列为420bp。SDS-PAGE和Western blot分析,表达的融合蛋白呈可溶性,相对分子质量约为45000。以其为抗原制备的SNCP抗血清的ELISA效价达到1:32000,并且该抗体可与BALB/c小鼠脑组织中内源性SNCP发生特异性反应。结论 人SNCP可在原核细胞中可溶性表达。用表达的蛋白制备获得特异性较好的SNCP抗血清,为进一步了解SCNP的结构和功能以及在中枢神经系统退行性疾病的作用提供了必要的实验基础。

关 键 词:α-共核蛋白  神经退行性变  原核表达  抗体制备
文章编号:1005-9202(2006)02-0201-04
收稿时间:2005-11-07
修稿时间:2005-12-13

Soluble expression and purification of human neuroprotein α-synuclein related to Parkinson's disease and its antibody preparation
HUANG Yin-Xia, HAN Jun, ZHANG Xiao-Guang,et al..Soluble expression and purification of human neuroprotein α-synuclein related to Parkinson''''s disease and its antibody preparation[J].Chinese Journal of Gerontology,2006,26(2):201-204.
Authors:HUANG Yin-Xia  HAN Jun  ZHANG Xiao-Guang  
Institution:HUANG Yin-Xia, HAN Jun, ZHANG Xiao-Guang,et al.State Key Laboratory for Infectious Disease Prevention and Control,National Institute for Viral Disease Control and Prevention,Chinses Center for Disease Control and Prevention,Beijing 100052,China
Abstract:
Keywords:
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