人β防御素-2基因在SPC细胞中的转染表达 |
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作者姓名: | 雷撼 钱桂生 梁永杰 黄桂君 吴国明 |
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作者单位: | 同济大学附属东方医院呼吸内科,上海,200120;第三军医大学全军呼吸病研究所,重庆,400038 |
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摘 要: | 目的合成人β防御素-2(hum anβ-defensin-2,hBD-2)基因并构建其真核表达载体,转染SPC细胞,检测其表达,明确hBD-2重组载体的表达活性,为hBD-2基因转染和表达的研究奠定基础。方法根据Genebank中的hBD-2结构基因序列设计合成三条引物,用PCR延伸扩增的方法合成hBD-2基因,克隆入真核表达载体pLXSN;通过脂质体转染法将pLXSN-hBD-2导入SPC细胞,采用W estern-b lot法检测hBD-2的表达。结果经凝胶电泳及测序分析,证实合成的基因与原序列一致,并成功克隆到真核表达载体pLXSN上,所构建的真核表达重组载体pLX-SN-hBD-2转染SPC细胞后呈现有效表达。结论成功构建了PCR合成的hBD-2基因真核表达重组载体pLXSN-hBD-2,通过基因转染的方法导入SPC细胞并获得表达hBD-2,为进一步的动物转基因抗感染实验研究提供了依据。
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关 键 词: | 人β防御素-2 基因合成 真核表达载体 基因转染 |
文章编号: | 1008-0392(2006)01-0027-04 |
收稿时间: | 2005-09-11 |
修稿时间: | 2005-09-11 |
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