| 2型重组腺相关病毒对脐血CD34+造血干/祖细胞的转导条件的优化 |
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| 引用本文： | 陈焱,陈方平,王光平,彭建强,吴小兵,吴新华. 2型重组腺相关病毒对脐血CD34+造血干/祖细胞的转导条件的优化[J]. 临床血液学杂志, 2006, 19(2): 97-100 |
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| 作者姓名： | 陈焱 陈方平 王光平 彭建强 吴小兵 吴新华 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医院血液科 长沙(陈焱，王光平)，中南大学湘雅医院血液科 410078(陈方平)，国家863计划生物领域病毒基因载体研发基地 410078(彭建强)，国家863计划生物领域病毒基因载体研发基地 长沙(吴小兵)，中南大学湘雅医院产科 410078(吴新华) |
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| 基金项目： | 国家863计划项目（N0.2001AA217181）,湖南省生命科学重点项目（99-02） |
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| 摘 要： | 目的:探索不同转导条件下2型重组腺相关病毒(rAAV-2)/绿色荧光蛋白(GFP)对人脐血CD34 细胞的转导效率。方法:人脐血CD34 细胞分别以IL-3加IL-6加干细胞因子(SCF)加Flt3配体(FL)(预刺激1组)或SCF加FL加血小板生长因子(预刺激2组)预刺激48 h后,转导rAAV-2/GFP,转导后2 d和7 d收集细胞,流式细胞仪检测GFP的表达,同时以金黄地鼠胚胎肾细胞(BHK-21)细胞作为阳性对照。结果:感染复数(MOI)为2×105病毒基因组(v.g)/cell时,rAAV-2/GFP能有效地转导CD34 细胞,2 d的GFP阳性率可达(28.05±4.47)%(S/F/T组),(27.44±4.99)%(3/6/S/F组),最高达43.36%,随着培养时间的延长,GFP表达有下降的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。预刺激1组、预刺激2组与无预刺激组的GFP阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),预刺激1组与预刺激2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MOI 2×105v.g/cell时,采用细胞因子预刺激可得到rAAV-2/GFP对人脐血CD34 细胞的有效转导,但本实验采用的2种预刺激条件对转导效率的提高没有明显区别。
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| 关 键 词： | 脐血 干细胞 造血祖细胞 绿色荧光蛋白 基因转导 |
| 文章编号： | 1004-2806（2005）04-0097-04 |
| 收稿时间： | 2005-03-14 |
| 修稿时间： | 2005-03-14 |
Transduction efficiency of recombinant adeno-associated virus 2 in human umbilical cord blood CD34+ hematopoietic stem/progenitor cells |
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| CHEN Yan,CHEN Fangping,WANG Guangping,PENG Jianqiang,WU Xiaobing,WU Xinhua. Transduction efficiency of recombinant adeno-associated virus 2 in human umbilical cord blood CD34+ hematopoietic stem/progenitor cells[J]. Journal of Clinical Hematology, 2006, 19(2): 97-100 |
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| Authors: | CHEN Yan CHEN Fangping WANG Guangping PENG Jianqiang WU Xiaobing WU Xinhua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adeno-associated virus 2 Stem cell hematopoietic progenitor Green fluorescent protein Genetic transduction |
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