| 端粒酶逆转录酶启动子联合CD自杀基因靶向杀伤人肝癌细胞研究 |
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| 引用本文： | 杨建青,潘光栋,褚光平,刘强,肖亿,袁林.端粒酶逆转录酶启动子联合CD自杀基因靶向杀伤人肝癌细胞研究[J].中华实验外科杂志,2008,25(7):848-850. |
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| 作者姓名： | 杨建青 潘光栋 褚光平 刘强 肖亿 袁林 |
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| 作者单位： | 广西柳州市人民医院肝胆外科,545001 |
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| 摘 要： | 目的 利用肿瘤特异性人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子介导自杀基因CD表达,检测其促进5-FC对肝癌细胞系的杀伤作用.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术获得hTERT基因的启动子片段,将其连至SV40增强子序列后,并克隆到表达荧光素酶基因的报告质粒上,检测hTERT基因启动子在肝癌细胞系Bel-7402和人成纤维细胞HDF中的转录活性,同时将CD自杀基因连至该调控序列后,转染肝癌细胞Bel-7402,通过逆转录(RT)-PCR、噻唑蓝(MTT)比色法检测其作为肝癌基因治疗中肿瘤特异性靶向杀伤载体的可行性.结果 成功构建pGL3-SV40-hTERT载体和SV40-hTERT-CD-GFP质粒载体,转染ST-CD载体后Bel-7402细胞表达CD基因,转染PGL3-SV40-hTERT质粒后Bel-7402细胞中hTERT启动子高表达,相对活性为354%.与未转染组比较,5-Fc对转染SV40-hTERT-CD-GFP质粒载体的肝癌细胞Bel-7402的杀伤效应明显增强(F=27.831,P<0.01).结论 hTERT启动子在肝癌细胞系中具有较强的转录活性,能有效地诱导CD自杀基因的表达.
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| 关 键 词： | 癌 肝细胞 端粒酶 逆转录酶 自杀基因 |
Targeted killing of human liver cancer cells by tumor specific promoter hTERT combined with suicide gene CD |
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