| 人乳头瘤病毒16型(新疆株)E6基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 李慎涛,庞海,张富春.人乳头瘤病毒16型(新疆株)E6基因的原核表达[J].地方病通报,2002,17(3):5-7. |
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| 作者姓名： | 李慎涛 庞海 张富春 |
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| 作者单位： | 1. 清华大学生物科学与技术系结构生物学实验室蛋白质科学重点实验室,北京,100084
2. 新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (39960 0 79)，教育部高访学者计划资助 |
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| 摘 要： | 根据人乳头瘤病毒16（新疆株）E6基因编码序列设计引物，从含有HPV16 E6基因的质粒中扩增出含HPV16 E6基因的CNA片段，该片段全长450bp，将所得片段与pMD18-T载体连接，转化到JM109大肠杆菌中，筛选的阳性克隆扩增后，提取质粒DNA，用BamH I和Sal I酶切，回收450bp的目的片段，定向克隆到pET28a中，转化JM109受体菌，从JM109受体菌中提出质粒，再转化到BL21（DE3）中，筛选出转化体，用IPTG诱导表达，在PAGE上见到所表达的18kD的特异性的HPV16（新疆株）E6蛋白条带。
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒16型 E6基因 原核表达 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-3711(2002)03-0005-03 |
| 修稿时间： | 2002年5月22日 |
Prokaryotic Expression of Xinjiang Strain HPV16 E6 Gene |
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| LI Shen-tao,PANG Hai,ZHANG Fu-chun.Prokaryotic Expression of Xinjiang Strain HPV16 E6 Gene[J].Endemic Diseases Bulletin,2002,17(3):5-7. |
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| Authors: | LI Shen-tao PANG Hai ZHANG Fu-chun |
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| Abstract: | A 450bp HPV16 E6 DNA fragment was amplified by using primers designed from the coding sequence of HPV16 E6 gene by PCR. The fragment containing the coding sequence of HPV16 E6 protein was cloned into vector pMD 18T ( pMD T HPV16E6) and transformed into E.coli JM109. Positive clone was identified successfully by enzyme digestion. The 450bp HPV16E6 DNA fragment was digested with BamH I and Sal I and subcloned into vector pET28a(+), forming the recombinant plasmid of pET28 HPV16E6.After induction with IPTG, the pET28HPV16E6 expressed a 18kD E6 protein in E.coli DL21(DE3).The result showed that HPV16 E6 gene can be expressed in E.coli in the form of inclusion body at a high yield. |
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| Keywords: | HPV16 E6 gene(Xinjiang strain) Prokaryotic expression SDS PAGE |
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