| 基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理 |
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| 引用本文： | 杨娟 贾晓康 张楚天 黄云梅 黄美雅 张志恒 孙攀 吴银生 林燕萍. 基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理[J]. 中国骨质疏松杂志, 2019, 0(8): 1067-1072 |
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| 作者姓名： | 杨娟 贾晓康 张楚天 黄云梅 黄美雅 张志恒 孙攀 吴银生 林燕萍 |
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| 作者单位： | 福建中医药大学，福建 福州 350122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（81473706,81574003） |
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| 摘 要： | 目的验证Cyclin D1及其下游信号蛋白对成骨细胞增殖的调控作用,探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的作用机制。方法培养成骨样细胞株UMR-106,运用CRISPR/Cas9技术敲减Cyclin D1基因后,将细胞分为基因敲减+生理盐水组(组1)、基因敲减+健骨颗粒组(组2)、病毒空载体细胞(组3,阴性对照)。未行基因敲减的细胞分为正常细胞+生理盐水组(组4)和正常细胞+健骨颗粒组(组5)。分别用生理盐水血清或健骨颗粒含药血清干预各组细胞24、48、72 h,通过CCK8法检测细胞增殖情况,利用Real time PCR检测Cyclin D1、Cyclin E、CDK 2、CDK 4、Rb及E2F-1基因的表达水平。结果经Western-bolt检测表明基因敲减的成骨细胞Cyclin D1蛋白表达明显下降。CCK8法检测结果显示,与组4相比,组5增殖速度变快(P0. 05),组3增殖速度无差异(P0. 05),组1和组2增殖速度均减慢(P0. 05);与组5相比,组2增殖速度减慢(P0. 01);与组1相比,组2增殖速度无统计学意义(P0. 05)。Real time PCR检测结果显示,与组4相比,组5 Cyclin D1、CDK2、CDK4、Cyclin E、Rb及E2F-1 mRNA的表达明显增高(P0. 05或P0. 01),组3表达无统计学意义(P0. 05),组1和组2表达明显降低(P0. 05或P0. 01);与组5相比,组2增殖速度减慢(P0. 01);与组1相比,组2无统计学意义(P0. 05)。结论 Cyclin D1及其下游信号蛋白是调控成骨细胞增殖的关键因素;健骨颗粒可以通过调节Cyclin D1及其下游信号蛋白促进成骨细胞增殖。
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| 关 键 词： | 健骨颗粒；成骨细胞；Cyclin D1；基因敲减；细胞增殖 |
The mechanism of Jiangu granule in promoting osteoblast proliferation based on Cyclin D1 knock-down |
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| YANG Juan,JIA Xiaokang,ZHANG Chutian,HUANG Yunmei,HUANG Meiy,ZHANG Zhiheng,SUN Pan,WU Yinsheng,LIN Yanping. The mechanism of Jiangu granule in promoting osteoblast proliferation based on Cyclin D1 knock-down[J]. Chinese Journal of Osteoporosis, 2019, 0(8): 1067-1072 |
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| Authors: | YANG Juan JIA Xiaokang ZHANG Chutian HUANG Yunmei HUANG Meiy ZHANG Zhiheng SUN Pan WU Yinsheng LIN Yanping |
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| Affiliation: | Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Jiangu granule osteoblast Cyclin D1 gene knock-down cell proliferation |
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