调控食管胃结合部腺癌增殖、侵袭能力的关键环状RNA分子的筛选与初步鉴定

目的：利用RNA高通量测序和生物信息学分析筛选出调控食管胃结合部腺癌（adenocarcinoma of esophagogastric junc－tion，AEG）增殖、侵袭能力的关键环状RNA分子，并对其作用方式进行初步探究。方法：提取22对食管胃结合部腺癌组织及癌旁正常黏膜组织的RNA。采用RNA高通量测序（测序深度200×），利用生物信息分析云平台进行差异基因筛选，同时对差异表达的基因构建共表达网络和circRNAs-miRNAs-mRNAs间的内源性RNA竞争机制（ceRNA）网络；利用RNA图谱共表达网络构建和内源性竞争RNA负相关分析，筛选出在AEG发生过程中可能发挥关键作用的circRNAs。并预测可与该circRNA存在ceRNA关系的miRNAs和mRNAs；通过qRT-PCR等方法对该circRNA在胃癌组织、癌旁组织中的表达进行验证。结果：通过RNA高通量测序，共预测得到46 553个circRNAs，对测序数据进行严格质控，得到26个差异表达的circRNAs（fold change≥2或fold change≤0.5，false discovery rate<0.05），其中10个circRNAs表达上调，16个circRNAs 表达下调。对组织样本进行mRNA和miRNA测序分析，构建circRNAs-miRNAs-mRNAs间的ceRNA网络、RNA图谱共表达网络和内源性竞争RNA负相关分析。结果表明，has_circ_0007766在AEG肿瘤组织中特异性高表达，可能在AEG发生发展过程中起关键作用；同时发现，miR4492与circRNA0007766和MET mRNA均有结合位点。结论：has_circ_0007766可能通过miR4492-circRNA0007766-MET mRNA的ceRNA网调控食管胃结合部腺癌增殖、侵袭，是AEG发生发展的关键circRNA。

Screening and preliminary identification of key circRNAs that regulate the proliferation and invasion of adenocarcinoma of the esophagogastric junction