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吴茱萸碱通过Hippo-YAP通路诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡的实验研究
引用本文:赵爽,郭星娴,周鹏,李国利,李静,陈地龙. 吴茱萸碱通过Hippo-YAP通路诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡的实验研究[J]. 中草药, 2019, 50(20): 4962-4968
作者姓名:赵爽  郭星娴  周鹏  李国利  李静  陈地龙
作者单位:重庆医科大学基础医学院 组织细胞工程与干细胞研究室, 组织学与胚胎学教研室, 重庆 400016,重庆医科大学基础医学院 组织细胞工程与干细胞研究室, 组织学与胚胎学教研室, 重庆 400016,重庆医科大学基础医学院 组织细胞工程与干细胞研究室, 组织学与胚胎学教研室, 重庆 400016,重庆医科大学基础医学院 组织细胞工程与干细胞研究室, 组织学与胚胎学教研室, 重庆 400016;重庆三峡医药高等专科学校, 重庆 400016,重庆医科大学基础医学院 组织细胞工程与干细胞研究室, 组织学与胚胎学教研室, 重庆 400016,重庆医科大学基础医学院 组织细胞工程与干细胞研究室, 组织学与胚胎学教研室, 重庆 400016;重庆三峡医药高等专科学校, 重庆 400016
基金项目:国家自然科学基金面上项目(31271368);重庆市教委重点项目(KJZD-K201802701)
摘    要:目的探讨吴茱萸碱对人肝癌细胞株BEL-7402凋亡的影响并阐明其发挥作用的可能机制。方法 CCK-8法检测吴茱萸碱对BEL-7402细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色观察吴茱萸碱对BEL-7402细胞凋亡现象的影响;流式细胞术观察吴茱萸碱对BEL-7402细胞凋亡和周期的影响;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blotting实验检测Hippo-YAP通路中哺乳动物STE20样蛋白激酶1(MST1)、MST2、大肿瘤抑制因子1(LATS1)和Yes相关蛋白(YAP)在正常人肝细胞株HL-7702与BEL-7402细胞中的表达差异及吴茱萸碱对BEL-7402细胞这些关键基因表达水平的影响;免疫荧光实验观察吴茱萸碱对BEL-7402细胞中YAP表达水平的影响。结果吴茱萸碱对BEL-7402细胞增殖活力具有明显的抑制作用(P0.05),呈浓度和时间依赖性;Hoechst 33258染色显示吴茱萸碱能够引起BEL-7402细胞出现核固缩、核边集等凋亡的典型形态学改变。流式细胞术结果提示吴茱萸碱能够诱导BEL-7402细胞出现凋亡数目增多和G2/M期阻滞(P0.01);q RT-PCR和Western blotting检测结果提示,与HL-7702细胞相比,MST2和LATS1在BEL-7402细胞中的表达明显下调(P0.05),YAP则明显升高(P0.05);吴茱萸碱能够激活Hippo信号通路,分别上调MST2、LATS1和抑制YAP在BEL-7402细胞中的表达水平(P0.05)。免疫荧光结果显示吴茱萸碱能够显著抑制BEL-7402细胞中过表达的YAP荧光强度(P0.01)。结论吴茱萸碱能诱导BEL-7402细胞的凋亡,其机制可能是通过激活Hippo信号通路,进而抑制下游关键基因YAP的表达。

关 键 词:吴茱萸碱  肝癌  凋亡  BEL-7402细胞  Hippo-YAP通路
收稿时间:2019-04-21

Evodiamine induces apoptosis of human hepatoma cell line BEL-7402 by Hippo-YAP pathway
ZHAO Shuang,GUO Xing-xian,ZHOU Peng,LI Guo-li,LI Jing and CHEN Di-long. Evodiamine induces apoptosis of human hepatoma cell line BEL-7402 by Hippo-YAP pathway[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2019, 50(20): 4962-4968
Authors:ZHAO Shuang  GUO Xing-xian  ZHOU Peng  LI Guo-li  LI Jing  CHEN Di-long
Affiliation:Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China,Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China,Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China,Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China;Chongqing Three Gorges Medical College, Chongqing 400016, China,Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China and Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, Department of Histology and Embryology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China;Chongqing Three Gorges Medical College, Chongqing 400016, China
Abstract:
Keywords:evodiamine  hepatocellular carcinoma  apoptosis  BEL-7402 cells  Hippo-YAP signal pathway
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