地龙抗凝血活性体外评价方法的建立

目的 建立一种基于全自动血凝分析仪测定纤维蛋白原-凝血酶时间的地龙及其相关制剂的抗凝血活性的体外评价方法。方法 以威廉环毛蚓提取物为研究对象，采用BCA蛋白测定法测定可溶性蛋白含量，以抗凝血活性为指标，建立纤维蛋白原-凝血酶时间法测定活性，以活性浓度与可溶性蛋白浓度的比值（比活）作为活性评价指标。结果 10批地龙提取物可溶性蛋白含量为（26.56±3.57）%，比活为（34.64±3.98）U·μg^-1。其比活大小与蚓激酶标准品（43.60 U·μg^-1）相当，且是市售蚯蚓酶（22.17 U·μg^-1）比活的1.5倍。结论 采用BCA蛋白测定法测定地龙提取物可溶性蛋白，方法简便、可靠；所建立的纤维蛋白原-凝血酶时间法，操作简便，人为影响因素小，结果客观准确，可用于实时测定，重复性和仪器精密度良好，线性范围较广，具有可行性，可用于地龙及其制剂活性的评价。

Research on the Determination of in Vitro Anticoagulant Activity of Earthworms