人骨肉瘤细胞MG-63侧群细胞的分离及耐药性研究

 目的 分选人骨肉瘤细胞MG-63中的侧群（side population，SP）细胞，并探讨SP细胞对化疗药物耐药的机制。方法 以流式细胞术仪检测、分选经DNA染料Hoechst 33342染色后MG-63中的SP细胞，采用CCK-8法检测顺铂对SP细胞与非侧群（non-SP）细胞的抑制率，并计算半数抑制浓度（IC₅₀）。荧光定量 PCＲ法检测SP细胞和non-SP细胞中 MRP、XRCC1、MGMT、ABCG2 mＲNA 的表达水平。结果 MG-63 细胞在细胞密度为9×10⁵个/ml、 Hoechst 33342 终质量浓度为5 μg/ml 时，MG-63 SP 细胞的比例最稳定，为（1.45±0.23）%，且细胞保持良好的活性。顺铂对SP细胞的IC₅₀为11.608 μg/ml，对non-SP细胞的IC50为6.876 μg/ml，两者比较差异有统计学意义（P<0.05）。MRP、XRCC1 、MGMT 和ABCG2 mＲNA 在 SP细胞中的表达分别是non-SP 细胞的 1.58 倍、1.61倍、2.36倍和3.14倍（P<0.05）。 结论 人骨肉瘤MG-63细胞中存在SP细胞亚群，与non-SP细胞相比，SP细胞对顺铂的耐药性更为明显，可能与其耐药基因MRP、XRCC1 、MGMT、ABCG2 mRNA的高水平表达有关。

Isolation of side population cells from the MG-63 osteosarcoma cell line and characterization of their chemotherapeutic resistance