| 人扁桃体B淋巴细胞mRNA的差异显示分析及活化B细胞表达的新EST的分离 |
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| 引用本文： | 殷际义,崔莲仙,赵庆,张正健,袁勃.人扁桃体B淋巴细胞mRNA的差异显示分析及活化B细胞表达的新EST的分离[J].中华微生物学和免疫学杂志,1999,19(2). |
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| 作者姓名： | 殷际义 崔莲仙 赵庆 张正健 袁勃 |
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| 作者单位： | 100005,北京,中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 |
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| 摘 要： | 目的分离新的Ｂ细胞活化基因。方法采用差异显示反转录ＰＣＲ技术（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）对人扁桃体活化和静止Ｂ细胞ｍＲＮＡ的差异显示情况进行分析，对显示片段进行克隆并行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析，对Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交阳性的ｃＤＮＡ片段进行测序并比较同源性。结果差异显示分析共获得明显差异表达的ｃＤＮＡ片段６２条，选择主要表达于活化Ｂ细胞上的２０条ｃＤＮＡ片段克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上，并逐一对静止和活化Ｂ细胞ＲＮＡ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析，其中６条ｃＤＮＡ片段在活化Ｂ细胞中呈Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交阳性且与差异显示情况相符，对它们进行测序，然后通过国际互联网与ＧｅｎＢａｎｋ，ＥＭＢＬ和ＤＤＢＪ的ＤＮＡ数据库比较序列同源性，发现其中４个克隆与已发现的基因具明显同源性，一个克隆是新的，另一个克隆虽然与人Ｔ细胞分泌的趋化因子Ｉ－３０９同源性达９５％，但二者转录本不同。结论通过ＤＤＲＴ－ＰＣＲ分离到两个可能为新的Ｂ细胞活化基因的ｃＤＮＡ片段，这为进一步克隆新的Ｂ细胞活化基因奠定了基础。
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| 关 键 词： | 扁桃体 B淋巴细胞 聚合酶链反应 Northern分析 |
Differential display analysis of mRNA from human tonsil B lymphocytes and isolation of new EST from activated B lymphocytes |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tonsil B lymphocyte Polymerase chain reaction Northern blot analysis |
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