β-榄香烯诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡的机制研究 |
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作者姓名: | 俞雯雯 张航 葛卫红 史丽云 |
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作者单位: | [1]浙江中医药大学药学院,杭州310053; [2]杭州师范大学医学院,杭州310036 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81270066); 教育部优博作者专项基金项目(201070); 浙江省自然科学基金项目(LY12H10007); 杭州市医疗科研及重点专科专病项目(20100633B11)~~ |
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摘 要: | [目的]探讨β-榄香烯(β-elemene,β-ELE)对人脑胶质瘤细胞株U251凋亡的诱导作用及对c-myc、hTERT、microRNA分子表达的影响。[方法]用β-榄香烯处理U251细胞株24小时,流式细胞术检测细胞凋亡;RT-PCR法检测c-myc、hTERT基因的表达;Western-blot检测cmyc、hTERT蛋白的表达;基因芯片检测β-榄香烯处理对细胞表达microRNA的影响,并以Real time-PCR法验证其中miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达水平。[结果]β-榄香烯明显诱导U251细胞的凋亡,与对照组(0μg·ml-1β-ELE)相比,实验组(100,200,300μg·ml-1β-ELE)的细胞凋亡有所增加,凋亡程度随着β-ELE的浓度增大而增加,具有统计学差异;β-榄香烯抑制了c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达,与对照组(0μg·ml-1β-ELE)相比,实验组(50,100,150μg·ml-1β-ELE)的c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达水平都有所下降,下降程度随着β-ELE的浓度增大而增加,具有统计学差异;基因芯片和Real time-PCR[结果]显示,与对照组(0μg·ml-1β-ELE)相比,实验组(150μg·ml-1β-ELE)miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达有所上调,具有统计学差异。[结论]β-榄香烯诱导了U251细胞凋亡抑制了c-myc、hTERT基因mRNA与蛋白的表达,显著上调了miR-654-3p、miR-431、miR-150和miR-1976的表达水平。因此,β-榄香烯诱导U251细胞凋亡的作用可能是通过其抑制c-myc、hTERT基因mRNA和蛋白的表达及上调microRNA来实现的。此机制为抗肿瘤药物的发展提供了一定的理论基础,值得进一步深入探讨。
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关 键 词: | β-榄香烯 U251 细胞凋亡 microRNA |
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