| 人碱性成纤维细胞生长因子基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究 |
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| 引用本文： | 张金池,吴明祥,王玉龙,郭平凡,刘学强. 人碱性成纤维细胞生长因子基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究[J]. 中华实验外科杂志, 2010, 27(10). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2010.10.023 |
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| 作者姓名： | 张金池 吴明祥 王玉龙 郭平凡 刘学强 |
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| 作者单位： | 福建医科大学附属第一医院血管外科,福建医科大学血管与腔内血管外科研究室,福州,350005 |
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| 基金项目： | 福建省科技厅基金资助省属高校项目 |
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| 摘 要： | 目的 观察人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因体外转染对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)bFGF表达的影响.方法 密度梯度离心、贴壁法培养分离SD雄性大鼠MSCs,体外扩增,流式细胞仪检测MSCs表面抗原表达.利用慢病毒载体系统介导将具有人源性bFGF基因转染至第2代MSCs,在倒置荧光显微镜下观察转染后细胞形态和生长的变化,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法鉴定bFGF在MSCs中的表达.结果 密度梯度离心、贴壁法培养分离可获得MSCs,P3代大鼠细胞利用流式细胞仪检测CD11b/c阳性细胞表达率为(13.2±0.6)%,CD34阳性细胞表达率为(1.2±0.5)%,CD44阳性细胞表达率(97.8±0.9)%,CD90阳性细胞表达率(96.8±1.4)%.MSCs转染48 h后,绿色荧光蛋白的表达明显增强.RT-PCR证实转基因MSCs表达bFGF mRNA明显增强,Western blot检测证实转基因MSCs在49 KDr出现特异性条带,而空白和空载组的MSCs则未见阳性条带.结论 采用慢病毒介导的基因转染技术可以将bFGF基因转染至MSCs中,并有外源性bFGFmRNA和蛋白的有效表达,MSCs可作为bFGF基因治疗的载体.
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| 关 键 词： | 成纤维细胞生长因子 骨髓间充质干细胞 转染 |
Transfection and expression of basic fibroblast growth factor gene mediated by lentivirus vector into rat mesenchymal stem cells |
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| ZHANG Jin-chi,WU Ming-xiang,WANG Yu-long,GUO Ping-fan,LIU Xue-qiang. Transfection and expression of basic fibroblast growth factor gene mediated by lentivirus vector into rat mesenchymal stem cells[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2010, 27(10). DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2010.10.023 |
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| Authors: | ZHANG Jin-chi WU Ming-xiang WANG Yu-long GUO Ping-fan LIU Xue-qiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Basic fibroblast growth factor Mesenchymal stem cells Transfection |
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