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重叠延伸PCR法构建HCV多表位嵌合抗原
作者姓名:冯惊涛  欧兰香  王彩霞  罗朝辉  胡道奇  聂东宋  周见远
作者单位:湖南景达生物工程有限公司,湖南岳阳414000
摘    要:[目的]构建具有免疫活性的HCV多表位嵌合抗原。[方法]选取带有优势抗原表位区域的4段HCV多肽和-段HER-2多肽,找出对应碱基序列,扩增目的基因。然后通过重叠延伸PCR(OE-PCR)法将扩增的目的基因拼接,并克隆到原核表达载体中进行表达、纯化和活性检测。[结果]重叠延伸PCR法构建原核表达载体成功,其所表达的HCV-HER-2嵌合抗原为包涵体表达,经纯化和复性后具有良好的抗原活性。[结论]成功地构建了HCV多表位嵌合抗原,并表达和纯化了目的蛋白,确定了其抗原活性。

关 键 词:HCV  重叠延伸PCR  嵌合抗原  ELISA
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