重叠延伸PCR法构建HCV多表位嵌合抗原 |
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作者姓名: | 冯惊涛 欧兰香 王彩霞 罗朝辉 胡道奇 聂东宋 周见远 |
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作者单位: | 湖南景达生物工程有限公司,湖南岳阳414000 |
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摘 要: | [目的]构建具有免疫活性的HCV多表位嵌合抗原。[方法]选取带有优势抗原表位区域的4段HCV多肽和-段HER-2多肽,找出对应碱基序列,扩增目的基因。然后通过重叠延伸PCR(OE-PCR)法将扩增的目的基因拼接,并克隆到原核表达载体中进行表达、纯化和活性检测。[结果]重叠延伸PCR法构建原核表达载体成功,其所表达的HCV-HER-2嵌合抗原为包涵体表达,经纯化和复性后具有良好的抗原活性。[结论]成功地构建了HCV多表位嵌合抗原,并表达和纯化了目的蛋白,确定了其抗原活性。
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关 键 词: | HCV 重叠延伸PCR 嵌合抗原 ELISA |
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