双氢睾酮对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素表达的影响

目的 探讨双氢睾酮（DHT）对大鼠原代卵泡颗粒细胞抗苗勒管激素（AMH）表达的影响。方法 从95只21 d SD雌性大鼠中提取颗粒细胞原代培养48 h后，先用HE染色检测细胞形态，卵泡刺激素受体（FSHR）细胞免疫荧光检测细胞纯度；然后根据干预方法和实验的不同，随机将细胞分为对照组（无药物干预）、10^-8mol/L DHT组、10^-5mol/L DHT组，2×10^-5mol/ L蛋白激酶B(Akt)抑制剂（MK-2206 2Hcl）组和10^-8mol/L DHT+2×10^-5mol/L MK-2206 2Hcl组，分别使用相应浓度的试剂干预细胞3 h。干预完成后，细胞免疫荧光染色观察AMH表达的部位和变化；Western blotting测定不同组的AMH、Akt、p-Akt蛋白表达量。结果 大鼠原代卵泡颗粒细胞的纯度为93.33%±3.09%，AMH表达在大鼠原代卵泡颗粒细胞膜和细胞质中；与对照组相比，10-8 mol/L DHT和10-5 mol/L DHT均可使颗粒细胞AMH表达增加（P<0.05），但这两个浓度的DHT对颗粒细胞AMH的表达影响差异无显著性（P>0.05）；与对照组相比，10^-8 mol/L DHT可以使p-Akt、AMH表达升高，2×10^-5 MK-2206 2Hcl使AMH表达降低（P<0.05）；与2×10^-5MK-2206 2Hcl相比，10^-8mol/L DHT+2×10^-5 MK-2206 2Hcl处理组AMH表达升高（P<0.05）。结论 DHT可以上调大鼠原代卵泡颗粒细胞AMH的表达，这种作用可能与Akt信号通路有关。