| 三氯乙烯诱导人表皮角质形成细胞凋亡中依赖Caspase-9的Caspase-3激活 |
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| 引用本文： | 沈彤,叶良平,汪立杰,张学军,朱启星. 三氯乙烯诱导人表皮角质形成细胞凋亡中依赖Caspase-9的Caspase-3激活[J]. 安徽医科大学学报, 2009, 44(6) |
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| 作者姓名： | 沈彤 叶良平 汪立杰 张学军 朱启星 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学公共卫生学院,合肥,230032;安徽医科大学皮肤病研究所,合肥,230032;安徽医科大学公共卫生学院,合肥,230032;安徽医科大学皮肤病研究所,合肥,230032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，安徽省教育厅自然科学重点科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡过程中可能的信号通路.方法 用0.125、0.25、015、1.0、2.0 mmol/L的TCE处理NHEK4 h,并培养4、8、12、24 h,分光光度法测上清中Caspase-9和Caspase-3活性,Annexin-V/PI双染后流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡;Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK和Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理组,用100 μmol/L ZDEVD-FMK或Z-LEHD-FMK预处理NHEK 1 h,再用2.0mmol/L TCE染毒4 h后培养至12 h.结果不同浓度TCE处理NHEK 4 h后培养不同时间,可诱导Caspase-3和Caspase-9活性升高,培养12、24 h时,各TCE处理组Caspase-3和Caspase-9活性与溶剂对照比差异有统计学意义(P<0.05).不同浓度TCE处理NHEK 4 h后培养12 h.凋亡细胞(Annexin-V+/PI-)所占百分比随TCE剂量增加而升高,除0.125 mmol/L TCE组外,其它各处理组AnnexinV+/PI-细胞所占百分比与对照组比差异均有统计学意义(P<0.05).相关分析显示Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与Caspase-3和Caspase-9活性都呈正相关(P<0.05).100 μmol/L Z-DEVD-FMK预处理明显抑制2.0 mmol/L TCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加(P<0.05),对Caspase-9活性影响不明显(P>0.05).100 μmol/L Z-LEHD-FMK预处理不仅抑制2.0mmol/L TCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加,还抑制Caspase-9活性上升(P<0.01).结论 TCE诱导NHEK凋亡中,内部凋亡途径中上游关键酶Caspase-9和下游效应分子Caspase-3均激活.且Caspase-3的激活依赖Casapase-9的活化.
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| 关 键 词： | 三氯乙烯 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9 细胞凋亡 |
Caspase-3 activation was dependent upon Caspase-9 in trichloroethylene induce normal human epidermis keratinocytes apoptosis |
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