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高密度培养大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm的优化条件
引用本文:张兴群,王粱华,焦炳华,袁勤生.高密度培养大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm的优化条件[J].医学教育探索,2005(1):72-75.
作者姓名:张兴群  王粱华  焦炳华  袁勤生
作者单位:[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237//第二军医大学基础医学部生化与分子生物学教研室,上海200433//东华大学化学与化工学院,上海200051 [2]第二军医大学基础医学部生化与分子生物学教研室,上海200433 [3]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30000078),国家"863"计划资助项目(2001AA215441)
摘    要:利用Bioengeering 3.7L自控式发酵罐,以分批培养和补料分批培养相结合的培养技术,高密度培养重组大肠杆菌TB1/pMAL-hOCIFm,生产重组人破骨细胞形成抑制因子成熟肽(recombinant human osteoclastogenesis inhibitory factor mature peptide,rhOCIFm)。通过对碳、氮源补加方式以及溶解氧等参数的控制,使工程菌E.coliTB1/pMAL-hOCIFm的发酵菌体OD600达到57.8,rhOCIFm与MBP融合蛋白(hOCIFm-MBP)的含量达到3.2g/L。本研究为工业化生产rhOCIFm奠定了基础。

关 键 词:破骨细胞形成抑制因子(OCIF)  表达  高密度培养  发酵  补料-分批培养

High Cell-Density Culture of E.coli TB1/pMAL-hOCIFm
ZHANG Xing-qun.High Cell-Density Culture of E.coli TB1/pMAL-hOCIFm[J].Researches in Medical Education,2005(1):72-75.
Authors:ZHANG Xing-qun
Institution:ZHANG Xing-qun~
Abstract:Batch and fed-batch culture process of E.coli TB1/pMAL-hOCIFm were carried out to produce recombinant human osteoclastogenesis inhibitory factor mature peptide (rhOCIFm) in 3.7 L Bioengineering autocontrol fermentor. High cell-density and high expression were achieved by the control of carbon/nitrogen source and dissolved oxygen. The final cell density and concentration of rhOCIFm-MBP (fusion) protein were 57.8 OD_(600) and 3.2 g/L respectively. The purity of rhOCIFm-MBP fusin protein was more than 70% after treated with affinity chromatography on amylose resin. This study provides a basic work for the production of rhOCIFm in industrial scale.
Keywords:OCIF  expression  high density culture  fermentation  fed-batch
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